血液细胞分析仪BC-5120标准操作程序SOP_V1.0_CH.pdf

BC-5120 血液细胞分析仪标准操作程序(SOP)第第 1 章章 概述概述1.1 预期用途预期用途适用于血液白细胞计数及分类，红细胞计数，血红蛋白，血小板计数，红细胞压积，红细胞体积分布宽度，平均红细胞血红蛋白含量，平均红细胞血红蛋白浓度，平均红细胞体积，血小板体积分布宽度、平均血小板体积和血小板压积等参数。1.2 测试原理测试原理1.2.1白细胞测量白细胞测量激光流式细胞技术溶血剂与血液样本混合后，红细胞被溶解而白细胞被染色。被染色的白细胞和红细胞碎片通过样本针注入充满稀释液的流动室中。在稀释液形成的鞘液包裹下，细胞经过二次加速排列成行地穿过激光检测区。细胞受到激光束的照射产生的散射光与细胞大小、细胞膜和细胞内部结构的折射率相关。光电二极管接收这些散射光信号并将其转化为电脉冲，根据采集到的这些电脉冲数据，可以得到血细胞大小及细胞内部信息的三维分布图，称为散点图。通过 WBC 散点图和直方图可得到白细胞五分类结果和计数结果1.2.2血红蛋白浓度测量血红蛋白浓度测量比色法被稀释的样本加入溶血剂后，红细胞溶解，释放出血红蛋白，后者与溶血剂结合后形成血红蛋白复合物。根据朗伯比尔定律，在中心波长为 530nm 的 LED单色光照射下，即可测得血红蛋白复合物溶液和本底情况下的透射光强，并通过计算获得血红蛋白浓度。1.2.3红细胞红细胞/血小板测量血小板测量阻抗法原理本分析仪利用阻抗法原理实现红细胞/血小板计数。RBC 计数池有一个小的开口，叫做检测小孔。小孔两侧有一对正负电极，连接恒流电源。由于细胞是电的不良导体，稀释后样本中的细胞在恒定负压的作用下通过检测小孔的时，电极间的电阻发生变化，从而在电极两端形成一个同细胞体积大小成比例的脉冲信号。脉冲的个数与通过小孔的细胞数相当，脉冲的幅度与细胞的体积成正比。将采集到的电脉冲放大后与正常的红细胞/血小板体积范围所对应的通道电压阈值相比较，计算出电脉冲幅度落在红细胞/血小板通道内的电脉冲个数。由此，所有采集到的电脉冲根据不同的通道电压阈值进行了分类，落在红细胞/血小板通道内的电脉冲个数就是红细胞/血小板的个数。依据脉冲电压幅度划分的每一个通道范围内的细胞个数决定了细胞的体积分布。用横坐标表示细胞体积，纵坐标表示细胞相对数量的二维图就是反映细胞群体分布情况的直方图。第第 2 章章 仪器信息仪器信息2.1 一般资料一般资料设备名称全自动血液细胞分析仪设备英文名称AUTO HEMATOLOGYANALZER型号BC-5120仪器编号技术规格仪器体积宽度 325 mm高度 435 mm（含地脚）深度 410 mm（不含接头）测试速度BC-5120 开放-全血/开放-预稀释/开放-末梢全血模式的检测速度为：不低于 40 样本/h；光源半导体激光检测系统流式细胞检测器主机号国别中国制造商深圳迈瑞生物医疗电子股份有限公司出厂日期设备到货日期设备到货状态新机器设备使用条件环境要求温度范围：1030；相对湿度：20%85%，大气压：70kPa106kPa电源要求电压：（100V-240V）允差10%，输入功率：300VA，频率：（50Hz/60Hz）1Hz空间要求主机左右侧门与墙壁的保留空间 50cm；主机后板与墙壁的保留空间 20 cm；稀释液放置于主机下方，相对主机的高度要求在 1.0米以内；安装台面（或地面）至少能承受约 40Kg 的重量。设备验收情况合格开始服役日期代理商代理商联系人代理商电话设备安放位置设备当前状态良好仪器说明书状态及存放处主要负责人使用人2.2 检验项目检验项目参数系参数系中文名称中文名称英文名称英文名称缩写缩写CBCCBC+DIFF白细胞系（15项）白细胞数目White Blood Cell countWBC嗜碱性粒细胞数目Basophils numberBas#/嗜碱性粒细胞百分比Basophils percentageBas%/中性粒细胞数目Neutrophils numberNeu#/中性粒细胞百分比Neutrophils percentageNeu%/嗜酸性粒细胞数目Eosinophils numberEos#/嗜酸性粒细胞百分比Eosinophils percentageEos%/淋巴细胞数目Lymphocytes numberLym#/淋巴细胞百分比Lymphocytes percentageLym%/单核细胞数目Monocytes numberMon#/单核细胞百分比Monocytes percentageMon%/红细胞系（8项）红细胞数目Red Blood Cell countRBC血红蛋白浓度Hemoglobin ConcentrationHGB平均红细胞体积Mean Corpuscular VolumeMCV平均红细胞血红蛋白含量Mean CorpuscularHemoglobinMCH平均红细胞血红蛋白浓度Mean CorpuscularHemoglobin ConcentrationMCHC红细胞分布宽度变异系数Red Blood Cell DistributionWidth-Coefficient ofVariationRDW-CV红细胞分布宽度标准差Red Blood Cell DistributionWidth-Standard DeviationRDW-SD红细胞压积HematocritHCT血小板系（4项）血小板数目Platelet countPLT平均血小板体积Mean Platelet VolumeMPV血小板分布宽度Platelet Distribution WidthPDW血小板压积PlateletcritPCT2.3 配套试剂配套试剂所有试剂应参照试剂的使用说明进行保存。变质、超过效期的所有试剂不能使用。2.4 标本类型标本类型EDTA-K2 或 EDTA-K3 抗凝静脉全血或末梢血标本（具体请参考手册）原始样品采集、制备、处理、检验和存放见检验科相关规范。2.4.1末梢血标本准备注意事项末梢血标本准备注意事项采集标本前，应使患者尽量保持平静，减少运动；尽量避免药物或饮食对检验结果的影响；除特殊情况外，尽量避免从耳垂采血，易受温度因素的影响；所选择的采血部位应完整，避免出现烧伤、冻疮、发绀、炎症等因素；采集过程中请勿使劲挤压，造成大量的组织间液和细胞内液的混入，以血液自然流出为好；尽可能使用同一规格的采血针，保证穿刺深度的一致性和足够的深度，便于血液的采集，避免交叉感染；抗凝管的容量建议选择 0.5ml1.5ml；采用末梢全血模式测定，建议采集末梢血血量为 120ul；末梢全血样本混匀方式：用手指轻轻弹击装有末梢血的抗凝管底部 8-10 次，使抗凝管内末梢血与抗凝剂充分混匀；末梢全血检测时间：在样本采集后 3 分钟到 2 小时内进行样本测定；末梢预稀释样本检测时间：建议样本与稀释液混匀后 3 分钟到半小时内检测；请勿将末梢全血或末梢预稀释样本置于 28低温保存。2.5 性能指标性能指标2.5.1主要参数显示范围主要参数显示范围参数显示范围WBC0.00109/L999.99109/LRBC0.001012/L18.001012/LHGB0 g/L300g/LPLT0109/L9999109/LHCT0%80%M-52D 稀释液M-52DIFF 溶血剂M-52LH 溶血剂M-52 探头清洁液2.5.2本底范围本底范围参数本底/空白计数的要求WBC0.20 109/LRBC 0.02 1012/LHGB 1 g/LHCT 0.5%PLT 10 109/L2.5.3线性范围线性范围2.5.4重复性指标重复性指标注：绝对偏差 d=测量值测量平均值参数线性范围线性误差（全血模式）线性误差（预稀释模式）WBC0.00109/L100.00109/L0.30109/L 或50.60109/L 或6RBC0.001012/L8.001012/L0.051012/L 或50.101012/L 或 10HGB0 g/L250g/L2g/L 或24g/L 或 4PLT0109/L1000109/L10109/L 或820109/L 或16参数检测范围全血样本重复性（CV/绝对偏差 d）预稀释样本重复性（CV/绝对偏差 d）WBC4.00109/L15.00 109/L2.04.0Neu%50.070.04.0(d)8.0(d)Lym%20.040.03.0(d)6.0(d)Mon%5.0%10.02.0(d)4.0(d)Eos%2.05.01.5(d)2.5(d)Bas%0.51.50.8(d)1.2(d)RBC3.50 1012/L 6.00 1012/L1.5%3.0%HGB110 g/L 180 g/L1.5%3.0%MCV70 fL120 fL1.0%2.0%PLT100 109/L 149 109/L6.0%10.0%150 109/L 500 109/L4.0%8.0%MPV/4.0%8.0%2.5.5携带污染率携带污染率参数携带污染率WBC0.5RBC0.5HGB0.6HCT0.5PLT1.02.5.6示值误差示值误差检测参数示值误差WBC10RBC6HGB7PLT15第第 3 章章 仪器使用仪器使用3.1 使用要求使用要求3.1.1安装要求安装要求3.1.1.1 空间要求空间要求仪器应安装在稳固工作台上。保证操作台面以及主机下方有足够的空间放置稀释液、废液桶。3.1.1.2 环境要求环境要求仪器设备周围应尽可能无尘、无机械振动、无污染、无大噪音源和电源干扰；无强电磁干扰源以及电刷型电机、闪烁荧光灯和经常开关的电接触性设备；不应放在通风条件差、阳光直射的环境中，或热源及风源前。3.1.2仪器安全仪器安全在仪器设备上面和周围不要使用可燃性危险品，避免引起火灾和爆炸。在电源打开状态下，禁止打开仪器背面面板，以免损害线路板；仪器设备使用前，必须认真检查设备之间连接及外接线(件)是否正确、正常，电源插头是否正确插接，设备是否处于正常状态。实验过程中如遇水、电故障或中断，应立即关闭影响仪器设备安全的有关开关，并实施安全保护措施。仪器设备的运输必须按 BC-5120 血液细胞分析仪使用说明书规定进行搬运，禁止鲁莽装卸，应避免倾斜，振动和碰撞。如果标本、试剂溢出在分析仪上，立即擦掉并依照检验科生物安全相关规范处理。3.1.3人员安全人员安全在仪器工作过程中，勿触及所有运动部件，避免直接人身伤害。禁止触摸 BC-5120 血液细胞分析仪内部的电路，尤其避免湿手触摸，以免造成电击。所有物品（样本、质控物、校准物、试剂、废液等），以及同这些物质接触的区域都有潜在的生物传染性危险。操作者在实验室接触相关物品和区域时，应遵守实验室生物安全操作规定，并穿戴好个人防护装备（如实验室防护衣，手套等）。试剂一旦接触皮肤，立即用大量水冲洗，如有需要请接受医生治疗；试剂一旦接触眼睛，立即用大量水冲洗，并接受医生治疗。3.2 开关机程序开关机程序3.2.1开机前准备开机前准备1.检查电源连接是否正常；2.检查试剂有无过保质期和冻结，长途搬运后需静置 24 小时；3.检查试剂管路及连接是否正常；4.检查废液桶是否有空间盛装废液；5.检查打印设备是否连接正常（可选）。3.2.2开机程序开机程序开机程序开机程序3.2.3关机程序关机程序3.3 仪器校准仪器校准3.3.1仪器校准原则仪器校准原则本分析仪在出厂前已完成了校准。由于分析仪本身性能是稳定的，不需要经常校准。在以下几种情况下，操作者仍需对分析仪进行校准：第一次使用之前；更换了主要部件后；主机较长时间不用，恢复使用时；每日查看当天的质控数据，看是否存在明显的偏差；使用环境（如温度）发生明显变化时。3.3.2仪器校准步骤仪器校准步骤BC-5120 血液细胞分析仪为保证仪器检测结果的可溯源性，为WBC/RBC/HGB/MCV/PLT 五项参数提供三种校准方式：人工校准：人为在计数界面进行校准，手动计算校准系数后在此界面输入；新鲜血校准：在此界面下按照仪器提示完成新鲜血校准，仪器自动计算并保存校准系数；校准品校准：在此界面下按照仪器提示完成校准品校准，仪器自动计算并保存校准系数。3.4 质量控制质量控制质量控制步骤如下：质控设定质控分析查看质控图查看质控列表BC-5120 仪器为用户提供 2 种质控方式：L-J 质控X-B 质控以下介绍最常用的 L-J 质控流程，其余质控详见手册。3.4.1质控设定质控设定1.点击“质控”标签，选择“L-J 质控”。2.点击“设定”按钮，进入 L-J 质控设定界面。3.通过“新建”或者“编辑”，设定质控信息，含：批号、有效期、模式等4.根据质控靶值单进行各参数靶值及偏差限设定。5.点击“质控”标签，选择“L-J 质控”中“计数”，选择需要执行质控分析的的文件号，界面显示对应的质控文件信息。3.4.2质控分析质控分析1.质控准备2.进入质控计数界面，选择质控文件号3.根据文件号，选择相应高中低值质控进行测试3.4.3质控结果回顾质控结果回顾3.4.4失控处理失控处理各实验室应制定本实验室质控失控规则，或者根据厂家提供的质控允许偏差限来进行是否失控的判断。如果质控结果超出质控偏差范围，建议按以下步骤操作，直至问题解决。1.检查质控编辑内容，如输入有误，进行修改。2.检查质控是否过有效期、质控开瓶时间是否超过 2 周。3.执行本底检测，如本底异常，参考“故障处理”进行排除。4.重新执行质控计数：当质控测试超出偏差限，用同瓶质控再测试一次，在偏差限范围则仪器工作正常，如还超偏差限，记录“室内质控失控报告单”。同一批号换一瓶质控进行测试 2 次，如其中一次结果在偏差限范围则仪器工作正常，如都超偏差限，记录“室内质控失控报告单”，评估是否对仪器进行校准或维修。5.如果上述步骤都未能得到在控结果，提示仪器可能出现故障，应联系维修人员。3.5 样本分析样本分析3.5.1样本准备样本准备3.5.1.1 全血样本准备全血样本准备3.5.1.2 预稀释样本准备预稀释样本准备3.5.1.3 末梢血样本准备末梢血样本准备3.5.2计数过程计数过程3.6 试剂更换试剂更换1.试剂用到一定量时仪器会有提示余量用完，并在界面右下角会给出报警提示，点击后弹出故障对话框，选择消除故障后，进去试剂管理界面，更换试剂。2.取一桶/瓶试剂，打开桶/瓶的包装盖，将试剂瓶盖组件插入后拧紧。3.点击故障对话框中的“消除故障”，或者点击主界面上面的试剂管理，对所需要更换的试剂执行更换试剂操作：选中需更换的试剂，设置试剂有效期，如使用外接条码扫描仪，则直接扫描条码，完成后点击“应用”按钮，提示加载信息加载成功后，点击“关闭”按钮，自动执行试剂更换。4.进行空白测试，测试合格后继续进行样本的测试。3.7 仪器设备的维护保养程序仪器设备的维护保养程序3.7.1定时维护定时维护仪器所有的维护都已写入软件，根据软件提示进行日常的维护即可保证仪器正常使用，也可在设置界面设置维护时间等。在定时维护设置界面设置每日定时探头液浸泡的时间和提醒时间，则每天提醒时间到时会提示执行探头液浸泡。关机操作相当于定时探头液浸泡。如每天关机，此操作系统将自动跳过。3.7.2按需维护按需维护3.7.2.1 清洗维护清洗维护在以下情况下需要对相应部件进行清洗：如果 WBC 和（或）HGB 本底结果超出本底范围，可执行 WBC 池的清洗。如果 RBC 和（或）PLT 结果超出本底范围，可执行 RBC 池的清洗。如果本底结果的散点图中粒子较多，或者 WBC 分类的效果不好，可执行流动室清洗或者流动室排堵。如采样针变脏，可执行采样针的清洗。根据需要，也可以执行整机清洗。3.7.2.2 探头清洁液浸泡探头清洁液浸泡在以下几种情况下执行探头清洁液浸泡：若 3.7.2.1 节中所述问题清洗无效时，可以执行探头清洁液浸泡。若由于仪器长时间没有使用导致本底超出范围、质控异常、散点图分类效果下降或者出现堵孔时执行了其他的维护操作后，情况没有改善。3.7.2.3 其他维护其他维护若出现堵孔消除故障无法解决问题时，可执行手动排堵。更换了主要部件或对分析仪液路系统进行了维修，应执行液路初始化。分析仪运输或长时间（1 周以上）不使用，应执行打包操作，避免试剂长时间在管路中形成结晶。3.8 仪器退役前的处理仪器退役前的处理3.8.1仪器表面消毒仪器表面消毒用 0.21.0%的次氯酸钠溶液对仪器表面进行消毒处理。3.8.2仪器内部消毒仪器内部消毒使用 23%的次氯酸钠溶液气雾胶对仪器内部进行消毒处理。3.8.3管路消毒管路消毒用 23%的次氯酸钠溶液对仪器管道进行消毒处理。如果仪器不能正常使用时，只能对部分可能的管道用 23%的次氯酸钠溶液进行浸泡处理。附表附表 1 室内质控失控单室内质控失控单室内质控失控报告单室内质控失控报告单编号：仪器名称及型号：失控日期：质控品名称：生产厂家：质控品批号：批号 1：批号 2：失控质控品批号：批号 1：批号 2：失控项目：WBC RBCHGBHCTMCV PLT违背的质控规则：超偏差范围 最大偏差范围失控原因：1.质控品2.试剂3其它：纠正措施：纠正后室内质控情况：操作者：专业组组长：检验科主任：附表附表 2 室内质控月报表室内质控月报表室内质控月报表仪器名称及型号：质控品名称：厂家：批号：开始日期：结止日期：项目N均值标准差 变异系数注意：此表中的数据为同一批号质控测试结果附表附表 3 室内失控情况汇总表室内失控情况汇总表室内失控情况汇总表室内失控情况汇总表仪器名称及型号：年月质控物名称：生产厂家：批号：失控报告数：项目质控结果个数失控次数违背的质控规则偏离方向失控原因