GBT9822-2008粮油检验谷物不溶性膳食纤维的测定国家标准规范.pdf

ICs 67.060B 中 华 人民 共 和 国 国 家 标 准GB/T982-2008代 替GB/T98221988粮油检验谷物不溶性膳食纤维的测定Inspection of grain and oils-Determination of insoluble dietarv fiber in cereals200B-1卜04发布2OO9-01-20实施鏖簏 串暂獬 畏 暑 衢 髌 蠹 瑾 扌 皙 墅 罹 严 垦发 布数码舫伪食品伙伴网http:/GB/T9822一2008本标准修改采用美国谷物化学师协会AACC方法32-(1999)不溶性膳食纤维(英 文版)。本标准与AACC方法32-20(1999)的主要技术差异如下:增加 了纤维素测定仪法;增加了精密度要求;将标准的注1修改为本标准5.17的注。本标准代替GB/T98221988谷物不溶性膳食纤维测定法。本标准与GB/T98221988的主要技术差异如下:天平的称量精度要求由0.0 0 1 g 改为0.0 0 0 1 g;样品的粉碎粒度 由“全部通过1m m 2m m 筛孔”改为“全部通过1m m 筛孔”;规定 了-淀粉酶浓度为2.5%;取消了作为加热过程中的消泡剂十氢萘;增加 了纤维素测定仪法;修改了对精密度的要求。本标准由国家粮食局提出。本标准由全国粮油标准化技术委员会归口。本标准起草单位:国家粮食储备局成都粮食储藏科学研究所。本标准主要起草人:何学超、程建华、肖学彬、冯永建、姜涛、兰盛斌。本标准所代替标准的历次版本发布情况为:GB/T98221988。亠曰亠刖GB/Tg 8222008粮油检验谷物不溶性膳食纤维的测定1 范围本标准规定了测定谷物不溶性膳食纤维的术语和定义、原理、试剂和材料、仪器设备、操作步骤、结果计算,以及精密度的要求。本标准适用于谷物中不溶性膳食纤维的测定。i 2 规范性引用文件 下列文件中的条歙逋过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注 日期的引用文仵,其随后所有的修改单(不包括勘误的内容)或侈订版均不适用于本杯谁,然雨,鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文仵的最新版本凡是不注 日期的引用文件,其聂新版本适用于本标准。GB5491 粮食、油料检验 扦 样、分样法GB/T6682 分析 实 验 室 用水 规 格 和试 验 方 法(GB/T6682z O08,03696:1987,MOD)3 术语 和 定 义下列术语和定义适用于本标准。3.1 :不溶性膳食纤维 h s o I u b k o i 曲呷 b e r j在 中性洗涤剂的消化作用下,样 品中的糖、淀粉、蛋 白质、果胶等物质被溶解除去后不能消化 的残渣。主要包括纤维紊1半纤维素、木质素.角质和二氧化硅及不溶挂灰分等。4 原理谷物样品经 中性洗涤剂溶液溲煮,残渣用热水充分洗涤后,加人淀粉酶溶液 以分解残 留的结合,态淀粉,再用水、丙酮洗涤并烘干,即为不溶性膳食纤维。f 5 试剂和材料9除非另有规定,所有试剂均为分析纯,实验用水应符合GB/T6682中三级水 的规格。5.1 乙二胺 四乙酸二钠(EDTA)。5.2 四硼酸钠(硼砂,N 助B 4 0 7 1 0 H 2 O)。5.3 十二烷基硫酸钠。5.4 乙二醇-乙醚。5.5 0.1 m o l/L 磷酸 氢二钠(N 饧H P O 4):称取1 4.2 g 磷酸 氢二钠(N 饧H P 0 4)溶于1 0 0 m L 水中。5.6 磷酸。5.7 0.1 mol/L 磷酸二氢钠(N aH 2 P o4):称取1 2.0 g磷酸二氢钠(N aH zP O 4)溶于1 0 0 mL 水中。5.8 艹淀粉酶:酶活性不低于8 0 0 A/mg。5.9 无水亚硫酸钠。5.10 精制玻璃纤维。5.1 1 石油醚:沸程3 0 6 0。1GB/T9822-20085.12 丙酮。5.13 甲苯。5.碘溶液:称取3.6g 碘化钾溶于 m L水中,加人 1.3g 碘,溶解后加水稀释至100m L。5.15 中性洗涤剂:将 18,61g 乙二胺 四乙酸二钠(5.1)和6.81g 四硼酸钠(5.2)混合,加入150m L水加热溶解得到溶液1;另将30g 十二烷基硫酸钠(5.3)和10m L乙二醇-乙醚(5.4)溶人700m L热水中,然后加人到溶液1中。将在。56g 磷酸氢二钠(5.5)溶于150m L热水中,也加人到溶液1中,混匀备用。如果需要,用磷酸(5.6)调节 p H至6.9 7.1。在储存过程 中如果溶液产生沉淀,可加热到60使沉淀溶解。5.1 6 磷酸盐缓冲溶液:用0.1 ml/L 的磷酸氢二钠(5.5)溶液3 8.7 mL 和0.1 mol/L 的磷酸二氢钠(5.7)溶液6 1.3 mL,配制成1 0 0 mL 0.1 m1/L 的磷酸盐缓冲液(pH 为7.0)。5.1 7 2.5%淀粉酶溶液:称取2.5 g淀粉酶(5.8)溶于1 0 0 mL pH 7.0 的磷酸盐缓冲溶液(5.1 6)中,离 心,过 滤,收 集滤液 备用。注:应 仔细选择淀粉酶,因为有些淀粉酶可抑制残留的半纤维素酶活性。淀粉酶活性测定可参考Su m m e r丿宁 法:Me t h d s o f En z y m d o g y,s.P.Co l o w i c k a n d N。D.Ka p l a n,e d s。,1955,p.149。6 仪器 设 备6.1 分析天平:分度值0.0 0 0 1 g。6.2 锥形瓶:5 0 0 mL。6,3 回流冷凝装置:能 与500m L锥形瓶瓶口相匹配。6,4 消化提取装置:在可调节温度的电加热板或垫有石棉网的电炉上,安 装500m L锥形瓶(6.2),瓶口上安装 回流冷凝装置(6.3)。该 电加热板能将25、0m L的水在5m i n 10m i n 内加热至沸腾。6.5 过滤器:30m L玻璃砂芯漏斗或与纤维测定仪匹配的玻璃坩埚(2号 滤片)。6.6 电烘箱:可控制温度1 1 0 1 3 0。6.7 电热恒温培养箱:温度保持在372。6.8 干燥器:装有有效干燥剂。6.9 抽滤装置:由玻璃砂芯漏斗和吸滤瓶组成,用水泵或真空泵抽滤。6.10 粉碎磨:能将样品粉碎,使其能完全通过筛孔为1m m(相当于z O目 30目)的筛。6.11 纤维测定仪:测定结果与手工法测定结果相 比较,其 准确度满足本标准的要求,仪 器 的精密度也满足本标准的要求。7 操作步骤7.1 扦样按G B 5 4 9 1 执行。7.2 试样的制备将分取的检验用样品用粉碎磨(6.10)粉碎,使其能全部通过1m m 筛孔,充分混合,储 于塑料瓶 中,放一小包樟脑精,盖 紧瓶塞保存备用。7.3 操作步骤用手工操作方法,按 7.3.1处理;用纤维素测定仪法,则按7.3.2处理。7.3.1 手工测定方法7.3.1.1 试样的预处理称取约1.0g 制各好的样品,准确到0。0001g(仍),置 于500m L锥形瓶(6.2)中,如果样 品粗脂肪含量超过10%,每克样 品需用25m L石油醚(5.11)分三次浸提。浸提 时加 人一定 量石油 醚,振 摇2GB/T982220081m i n,静置5m i n,振摇、静置三次后,倾 出上清液,如 此反复。最后一次倾 出上清液后,置 通风橱 内让残 留石油醚挥发。7.3.1.2 试样的消化将装有试样 的锥 形 瓶 安装 在 消化 提取 装 置(6。4)上,先 向锥 形 瓶 中加 人100m L中性 洗 涤 剂(5.15),再加人0.50g 无水亚硫酸钠(5.9),启动消化装置,在 5m i n 10m i n 内使锥形瓶 内容物加热至沸腾,从沸腾开始记时,调节电热板温度,使锥形瓶 内容物保持微沸60m i n,关闭消化装置。7.3.1.3 过滤器准备在洁净的玻璃砂芯漏斗(6.5)中加人1。Og 3。Og 精制玻璃纤维(5.10),并使其形成杯状,放 人110电烘箱(6.6)中至少干燥4h,取出,放进干燥器(6.8)中冷却至室温,称量,复烘至恒质,得到玻璃砂芯漏斗和玻璃纤维的质量 。7.3.1.4 第一次过滤将烘至恒质玻璃砂芯漏斗联接到抽滤装置(6.9)上,把经消化处理的样品倾人玻璃砂芯漏斗中的玻璃纤维中间,抽滤,用至少500m L90 100热水分数次清洗残渣,每次洗涤后抽滤去水。7.3.1.5 酶解取下玻璃砂芯漏斗,将一定量(约 50m L)的2.5%淀粉酶溶液(5.17)加到 已过滤 的中性洗涤纤维残余物中,使酶液完全浸泡全部样品,让约10m L酶液滤出,以置换玻璃过滤器 中残 留的清洗水。用橡皮塞塞住玻璃砂芯漏斗的底部并加人几滴 甲苯(5.13),放人372电热恒温培养箱(6.7)中恒温18h(过夜)。7.3.1.6 第二次过滤取 出电热恒温培养箱 中的玻璃砂芯漏斗,除去底部的塞子,并将其连接到过滤装置上,抽 滤去除酶液,用至少300m L90 100热水,分数次清洗残渣,以洗去残 留酶液,用碘液(5.14)检查是否有淀粉残 留,如有残 留,则重复7.3.1.5的操作,加酶水解淀粉至淀粉全部除去。然后抽干样品。7.3.1.7 丙酮浸提取下玻璃 砂 芯漏 斗,用 橡皮塞塞住玻璃砂芯漏 斗 的底部,在 玻璃砂 芯漏 斗 中加 人 m L丙酮(5.12)浸提10m i n,除去底部的塞子,抽滤,再用10m L丙酮分两次洗涤,抽干。7.3.1.8 烘干及称量将玻璃砂芯漏斗取下,于110烘箱 中干燥2h 4h,取出,置 于干燥器 中冷却至室温,称 量至恒质,得到残留物、玻璃砂芯漏斗和玻璃纤维的质量 饧。7.3.2 纤维素测定仪法7.3.2.1 玻璃坩埚的准备将玻璃坩埚(6.5)洗净,放人110电烘箱(6.6)至少干燥4h,在干燥器(6.8)中冷却至室温,称量至恒质,得到空玻璃坩埚质量仞7.3.2.2 试样的预处理称取约1.0g 制各好的样品,准确到0。0001g(勿),放 人准备好的玻璃坩埚中。如果样品粗脂肪含量大于10%,每克样品需用25m L石油醚分三次抽提。浸提用纤维素测定仪的冷抽提装置在室温下进行,每次抽提约8m i n。7.3.2.3 试样的消化将装有样品的玻璃 坩埚 安装 在纤 维测定仪(6.11)的相应 位 置,顺 序加人100m L中性 洗 涤剂(5.15)和0.50g 无水亚硫酸钠(5.9)。启动仪器开关,使之加热,在 5m i n 10m h 内使玻璃坩埚 内容物至沸,然后从沸腾开始记时,保持微沸60m h。7.3.2.4 第一次过滤样品微沸消化60m i n 后,启动抽滤开关抽滤净全部液体,用至少500m L90 10o 热水,分数次清洗残渣并抽滤净全部液体。GB/T9822-20087.3.2.5 酶解将玻璃坩埚从仪器上取下,放进50m L小烧杯,将 2.5%淀粉酶溶液(5.1?)加到玻璃坩埚 中,使酶液超过并没过样品(约 30m L),加人几滴 甲苯(5.13),放人372电热恒温培养箱(6.7)中,恒温18h(过夜)。7.3.2.6 第二次过滤将玻璃坩埚重新安装在纤维测定仪(6.11)上,启动仪器抽滤开关,抽 滤净酶液,用 至少300m L90 100热水,分数次清洗残渣并抽滤净液体。7.3.2.7 丙酮抽提加人 m L丙酮(5。12)浸提10m i n,抽滤,再加人 10m L丙酮分两次洗涤并抽滤净液体。7.3.2.8 烘干及称至将玻璃坩埚取下,于 110烘箱中干燥2h 4h,取出,置 于干燥器(6.8)中冷却至室温,称量至恒质,得到残留物和玻璃坩埚的质量 饧。8 结果计算8.1 试样 中不溶性膳食纤维含量按式(1)计 算:X=饧 狃1 1 0 0 (1)彻式 中:X试样中不溶性膳食纤维含量(以 质量分数 汁),%;饧一 玻 璃滤器及残 留物烘干后的质量,单位为克(g);钧一 一玻璃滤器烘干后的质量,单位为克(g);御试样的质量,单位为克(g)。8.2 两个平行样测定结果的绝对差值不应超过1,0%,以平均值作为测定结果,结 果保 留到小数点后二位。9 精密度在同一实验室,由 同一操作者使用相同设各,按相同的测试方法,并 在短时间内对 同一被测对象相互独立进行测试获得 的两次独立测试结果 的绝对差值不大于1%的概率不低于95%。版权专有 侵权必究书 号:1 5 5 0 6 6 3 5 5 0 600丨内o臼0GB/T 9822-2008定价:1 0.0 0 元食品伙伴网http:/