关于一般药理、急性毒性和长期毒性研.ppt

关于一般药理、急性毒性和长期毒性研究关于一般药理、急性毒性和长期毒性研究非临床研究评价之非临床研究评价之国家药品审评中心国家药品审评中心2011.03.192021/5/181几个概念几个概念一般药理学研究一般药理学研究急性毒性研究急性毒性研究长期毒性研究长期毒性研究内容提要内容提要2021/5/182主要药效学主要药效学 Primary Pharmacodynamics 期望的与治疗目的相关的效应和作用机制期望的与治疗目的相关的效应和作用机制次要药效学次要药效学 Secondary Pharmacodynamics非期望的、与治疗目的不相关的效应和作用机制非期望的、与治疗目的不相关的效应和作用机制安全药理学安全药理学 Safety Pharmacology治疗范围内或以上，潜在的对生理功能的不良影响治疗范围内或以上，潜在的对生理功能的不良影响一般药理学一般药理学 General Pharmacology主要药效学作用以外进行的广泛的药理学研究主要药效学作用以外进行的广泛的药理学研究包括次要药效学和安全药理学包括次要药效学和安全药理学几个概念几个概念2021/5/183一般毒理一般毒理 General Toxicologyo安全药理学安全药理学o单次给药毒性单次给药毒性o重复给药毒性重复给药毒性o等等特殊毒理特殊毒理 Special Toxicology“三致三致”致癌致畸致突变致癌致畸致突变o遗传毒性（致突变）遗传毒性（致突变）o生殖毒性（致畸）生殖毒性（致畸）o致癌性致癌性几个概念几个概念2021/5/184临床前研究临床前研究Preclinical StudyoPreclinical Efficacy StudyoPreclinical Safety Study非临床研究非临床研究Nonclinical StudyoNonclinical Efficacy StudyoNonclinical Safety Study前临床研究前临床研究（）几个概念几个概念2021/5/185一般药理学一般药理学指对主要药效学作用以外进行的广泛的药理学研究，包括指对主要药效学作用以外进行的广泛的药理学研究，包括安全药理学和次要药效学研究。安全药理学和次要药效学研究。安全药理学安全药理学主要是研究药物在治疗范围内或治疗范围以上的剂量时，主要是研究药物在治疗范围内或治疗范围以上的剂量时，潜在的不期望出现的对生理功能的不良影响，即观察药物潜在的不期望出现的对生理功能的不良影响，即观察药物对中枢神经系统、心血管系统和呼吸系统的影响。对中枢神经系统、心血管系统和呼吸系统的影响。根据需要可能进行追加和根据需要可能进行追加和/或补充的安全药理学研究。或补充的安全药理学研究。一般药理学一般药理学2021/5/186安全药理学概念最早出现于安全药理学概念最早出现于1997年年ICH M3指导原则和指导原则和S6指导原则，重点发现新药的不指导原则，重点发现新药的不良反应，为新药进入临床或上市提供参考良反应，为新药进入临床或上市提供参考而一般药理学出现较早，如而一般药理学出现较早，如1991日本厚生劳日本厚生劳动省制定一般药理学研究指南，侧重于发现动省制定一般药理学研究指南，侧重于发现新药对器官功能不能预测的作用和其他药理新药对器官功能不能预测的作用和其他药理学作用学作用一般药理学一般药理学2021/5/1872001年的年的ICH制订安全药理学指导原则，即制订安全药理学指导原则，即S7A Safety Pharmacology Studies for Human Pharmaceuticals，重视了对药物的安全性评价与临床，重视了对药物的安全性评价与临床的相关意义的相关意义当前，在新药研究领域，一般药理学的概念逐渐淡出，当前，在新药研究领域，一般药理学的概念逐渐淡出，被安全药理学替代。当前的内容实质基本一致被安全药理学替代。当前的内容实质基本一致一般药理学一般药理学2021/5/188我国在制定指导原则时考虑了上述历史和现状我国在制定指导原则时考虑了上述历史和现状与与注册管理办法注册管理办法等法规保持一致，并符合传统习等法规保持一致，并符合传统习惯惯与国际接轨与国际接轨中外结合：一般药理学（中外结合：一般药理学（Safety Pharmacology)属于安全性研究范畴，需要遵循属于安全性研究范畴，需要遵循GLP规范规范一般药理学一般药理学2021/5/189一般药理学试验一般药理学试验Safety Pharmacology Study王庆利王庆利 胡晓敏胡晓敏 药审中心药理毒理学部药审中心药理毒理学部2021/5/1810研究目的研究目的通过一般药理学的研究，确定药物非期望药通过一般药理学的研究，确定药物非期望药效的性质，它可能关系到人的安全性；评价效的性质，它可能关系到人的安全性；评价药物在毒理学或药物在毒理学或/和临床研究中所观察到的不和临床研究中所观察到的不良药物作用和良药物作用和/或病理生理作用；研究所观察或病理生理作用；研究所观察到的和到的和/或推测的不良药物作用机制。或推测的不良药物作用机制。一般药理学一般药理学2021/5/1811意义意义与药效、毒理作用的关系与药效、毒理作用的关系-药物临床前研究是一药物临床前研究是一个系统工程，为长毒试验设计指标提供参考个系统工程，为长毒试验设计指标提供参考一般药理学属于广泛的一般药理学属于广泛的药理作用和安全性试验药理作用和安全性试验的范围，与药效、毒理研究密切相关的范围，与药效、毒理研究密切相关有助于了解新药药理作用的机制有助于了解新药药理作用的机制有利于新的药理作用的发现有利于新的药理作用的发现一般药理学一般药理学2021/5/1812试验材料试验材料在体试验在体试验o常用小鼠、大鼠、豚鼠、家兔、犬等常用小鼠、大鼠、豚鼠、家兔、犬等o动物选择应与试验方法相匹配动物选择应与试验方法相匹配体外试验体外试验o离体器官及组织、细胞、受体等离体器官及组织、细胞、受体等 一般药理学一般药理学2021/5/1813试验材料试验材料实验动物排除了猫实验动物排除了猫建议用清醒动物建议用清醒动物o麻醉状态下，心率、血压、体温等逐渐降低麻醉状态下，心率、血压、体温等逐渐降低o麻醉药物影响心血管系统，如戊巴比妥钠，深度麻麻醉药物影响心血管系统，如戊巴比妥钠，深度麻醉可见醉可见QT间期延长间期延长o计算计算QTCo举例：举例：XX脂质体，显著延长麻醉犬脂质体，显著延长麻醉犬QT间期间期一般药理学一般药理学2021/5/1814受试物受试物口服制剂：一般用原料口服制剂：一般用原料外用药物和注射剂：一般用制剂外用药物和注射剂：一般用制剂受试物尽量与药效学或毒理学研究的一致受试物尽量与药效学或毒理学研究的一致受试物与临床样品相关性：工艺、处方等受试物与临床样品相关性：工艺、处方等一般药理学一般药理学2021/5/1815样本量样本量分组及每组动物数的设定，应以能科学合分组及每组动物数的设定，应以能科学合理地解释所获得的试验结果，恰当地反映理地解释所获得的试验结果，恰当地反映有生物学意义的作用，并符合统计学要求有生物学意义的作用，并符合统计学要求为原则为原则小动物每组一般不少于小动物每组一般不少于10只，大动物每组只，大动物每组一般不少于一般不少于6只只一般药理学一般药理学2021/5/1816剂量剂量在体试验在体试验o观察不良反应的剂量观察不良反应的剂量反应关系，时效关系反应关系，时效关系o剂量包括或超过主要药效学的有效剂量或治疗范围剂量包括或超过主要药效学的有效剂量或治疗范围o如果研究中缺乏不良反应的结果，试验的最高剂量为如果研究中缺乏不良反应的结果，试验的最高剂量为相似给药途径和给药时间的其它毒理试验中产生中等强相似给药途径和给药时间的其它毒理试验中产生中等强度不良反应的剂量度不良反应的剂量体外试验体外试验o确定受试物的浓度确定受试物的浓度效应关系效应关系一般药理学一般药理学2021/5/1817对照对照溶媒和溶媒和/或辅料或辅料o 吐温（犬）、乳糖等吐温（犬）、乳糖等 阳性对照药阳性对照药化药化药 o 1.3类：光学异构体，消旋体及另外对映体类：光学异构体，消旋体及另外对映体o 2类：改变给药途径，原途径类：改变给药途径，原途径o 4类：改变酸根、碱基的药物，原化合物类：改变酸根、碱基的药物，原化合物一般药理学一般药理学2021/5/1818给药途径给药途径与临床拟用途径一致。如果有多个临床拟用给药与临床拟用途径一致。如果有多个临床拟用给药途径时，分别采用相应的给药途径评价其作用更途径时，分别采用相应的给药途径评价其作用更合适合适对于在动物试验中难以实施的特殊的临床给药途对于在动物试验中难以实施的特殊的临床给药途径，可根据受试物的特点选择径，可根据受试物的特点选择o喷雾剂、吸入剂、舌下用药喷雾剂、吸入剂、舌下用药一般药理学一般药理学2021/5/1819给药次数给药次数一般采用单次给药一般采用单次给药根据具体情况合理设计根据具体情况合理设计o与药效、毒理相关与药效、毒理相关主要药效学：多次给药起效主要药效学：多次给药起效毒理：重复给药反应毒理：重复给药反应一般药理学一般药理学2021/5/1820观察时间观察时间制剂特点：缓释制剂制剂特点：缓释制剂药效学特点药效学特点药代动力学特性药代动力学特性拟临床研究方案拟临床研究方案一般药理学一般药理学2021/5/1821主要研究内容主要研究内容核心组合试验核心组合试验对重要生命功能系统的影响对重要生命功能系统的影响o 精神神经系统、心血管系统、呼吸系统精神神经系统、心血管系统、呼吸系统追加和追加和/补充的安全药理学研究补充的安全药理学研究 o 中枢神经系统、心血管系统、呼吸系统、中枢神经系统、心血管系统、呼吸系统、o 肾脏系统、植物神经系统、胃肠系统肾脏系统、植物神经系统、胃肠系统 其它研究其它研究o 潜在的依赖性、免疫功能、内分泌功能潜在的依赖性、免疫功能、内分泌功能一般药理学一般药理学2021/5/1822核心组合试验核心组合试验心血管、中枢神经系统、呼吸系统心血管、中枢神经系统、呼吸系统o重视药品潜在的心室复极化延迟作用（重视药品潜在的心室复极化延迟作用（QT间期间期延长延长)的评价的评价:抗精神病、抗组胺类、抗心率失抗精神病、抗组胺类、抗心率失常类、消化系统药物、氟喹诺酮类药物常类、消化系统药物、氟喹诺酮类药物 ICH：评价人用药品潜在致心室复极化延迟作用：评价人用药品潜在致心室复极化延迟作用（QT间期延长）的安全药理学研究（间期延长）的安全药理学研究（S7B）一般药理学一般药理学2021/5/1823追加安全性药理学研究追加安全性药理学研究根据药物的药理性质和化学类型，估计可能出现根据药物的药理性质和化学类型，估计可能出现的不良反应，可能需要进一步追加安全药理学研的不良反应，可能需要进一步追加安全药理学研究项目究项目如果对已有的动物和临床试验产生怀疑，可能影如果对已有的动物和临床试验产生怀疑，可能影响到人体安全，应进一步追加安全性药理学研究响到人体安全，应进一步追加安全性药理学研究 对心血管、中枢神经、呼吸系统的深入研究对心血管、中枢神经、呼吸系统的深入研究一般药理学一般药理学2021/5/1824追加安全性药理学研究追加安全性药理学研究中枢神经系统中枢神经系统o行为、学习记忆、神经生化、视觉、听觉和行为、学习记忆、神经生化、视觉、听觉和/或电生理等或电生理等心血管系统心血管系统o心输出量、心肌收缩、血管阻力等心输出量、心肌收缩、血管阻力等呼吸系统呼吸系统o气道阻力、肺动脉压力、血气分析等气道阻力、肺动脉压力、血气分析等一般药理学一般药理学2021/5/1825补充的安全性药理学研究补充的安全性药理学研究泌尿、肾脏系统泌尿、肾脏系统自主神经系统自主神经系统胃肠系统胃肠系统一般药理学一般药理学2021/5/1826试验方法试验方法根据药物的特点和临床使用的目的，合理地进行根据药物的特点和临床使用的目的，合理地进行试验设计试验设计选用国内外公认的方法，包括科学而有效的新技选用国内外公认的方法，包括科学而有效的新技术和新方法术和新方法某些安全药理学研究可根据药效模型、药代动力某些安全药理学研究可根据药效模型、药代动力学的特征、试验动物的种类等来选择实验方法学的特征、试验动物的种类等来选择实验方法一般药理学一般药理学2021/5/1827新药临床前：完成对主要器官（精神神经、心血管、新药临床前：完成对主要器官（精神神经、心血管、呼吸系统，核心组合试验）功能影响的研究呼吸系统，核心组合试验）功能影响的研究临床期间、上市之前：补充安全性药理学研究临床期间、上市之前：补充安全性药理学研究贯穿在新药研究全过程中贯穿在新药研究全过程中一般药理学一般药理学2021/5/1828执行执行GLP规范规范药品注册管理办法第十六条药品注册管理办法第十六条o药物的安全性评价研究必须执行药物的安全性评价研究必须执行药物非临床研究质量管理规范药物非临床研究质量管理规范（GLP）o为什么？规范，统一，真实、完全、可靠为什么？规范，统一，真实、完全、可靠属于安全性评价的范畴，原则上须执行属于安全性评价的范畴，原则上须执行GLP核心组合实验应执行核心组合实验应执行GLP追加的或追加的或/和补充的安全药理学研究应尽可能的遵循和补充的安全药理学研究应尽可能的遵循GLPoQT间期试验间期试验一般药理学一般药理学2021/5/18292005年发布：年发布：中药、天然药物一般药理学研究技术指导原则中药、天然药物一般药理学研究技术指导原则化学药物一般药理学研究技术指导原则化学药物一般药理学研究技术指导原则计划修订、合并、补充：计划修订、合并、补充：药物安全药理学研究技术指导原则药物安全药理学研究技术指导原则一般药理学一般药理学2021/5/1830概念概念急性毒性试验研究动物一次或急性毒性试验研究动物一次或24小时内多次小时内多次给予受试物后，观察一定时间内所产生的毒给予受试物后，观察一定时间内所产生的毒性反应性反应Acute toxicity test 急性毒性试验急性毒性试验Single dose toxicity test o单次给药毒性试验单次给药毒性试验o单剂量毒性试验（单剂量毒性试验（）急性毒性试验急性毒性试验2021/5/1831急性毒性试验急性毒性试验Single Dose Toxicity Test王庆利王庆利 药品审评中心药理毒理学部药品审评中心药理毒理学部2021/5/1832急性毒性试验意义的历史演变急性毒性试验意义的历史演变OECD 1987o多个剂量组、适当的剂量间距，产生一系毒性和死亡多个剂量组、适当的剂量间距，产生一系毒性和死亡率，得到剂量率，得到剂量-效应关系和精确的效应关系和精确的LD50o标化药物强度标化药物强度o计算药物的治疗指数计算药物的治疗指数o是后续重复给药毒理试验剂量选择的参考是后续重复给药毒理试验剂量选择的参考o获得一些生物利用度的信息获得一些生物利用度的信息o试验结果可用来推测人类的致死剂量以及中毒后的症试验结果可用来推测人类的致死剂量以及中毒后的症状，为临床毒副反应监测提供参考状，为临床毒副反应监测提供参考急性毒性试验急性毒性试验2021/5/1833 随着科学的进步，越来越多的新药研发机构和管理当随着科学的进步，越来越多的新药研发机构和管理当局意识到了经典的急性毒性试验存在的局限性局意识到了经典的急性毒性试验存在的局限性 提供的信息不足以支持长毒试验的剂量选择提供的信息不足以支持长毒试验的剂量选择 从生物学的角度看，从生物学的角度看，LD50没有恒定的数值没有恒定的数值 通常所用的剂量与临床人用剂量差别很大通常所用的剂量与临床人用剂量差别很大 人和动物对药物的敏感性差别很大人和动物对药物的敏感性差别很大 不必要的动物和资源的浪费不必要的动物和资源的浪费急性毒性试验急性毒性试验2021/5/1834对于新药开发来说，急性毒性试验通常没有必要求出精对于新药开发来说，急性毒性试验通常没有必要求出精确的确的LD50值，所要关注的是动物出现的毒性及与剂量值，所要关注的是动物出现的毒性及与剂量间的量效关系，在啮齿类动物中不再需要给以致死水平间的量效关系，在啮齿类动物中不再需要给以致死水平的剂量的剂量但特殊的情况下，从科学的角度需要测定但特殊的情况下，从科学的角度需要测定LD50值，如值，如细胞毒类抗癌药物，通常用细胞毒类抗癌药物，通常用LD50的的1/10来估计来估计I期临床期临床试验的安全起始剂量试验的安全起始剂量急性毒性试验急性毒性试验2021/5/18351991第一届第一届ICH会议会议经典的经典的LD50 测定已不再是正式要求了测定已不再是正式要求了建议进行逐渐增加剂量的耐受性研究以监测不同剂量下的建议进行逐渐增加剂量的耐受性研究以监测不同剂量下的毒性反应毒性反应 建议采用两种哺乳动物建议采用两种哺乳动物可以用两种啮齿类动物或一种啮齿类动物加一种非啮齿类可以用两种啮齿类动物或一种啮齿类动物加一种非啮齿类动物的严格设计的、单次给药的、逐渐增加剂量的耐受性动物的严格设计的、单次给药的、逐渐增加剂量的耐受性研究，取代啮齿类动物或非啮齿类动物研究，取代啮齿类动物或非啮齿类动物LD50测定的要求测定的要求急性毒性试验急性毒性试验2021/5/1836基于上述科学认识和国内的研发实际，基于上述科学认识和国内的研发实际，2005年起草年起草发布了当前的技术指导原则发布了当前的技术指导原则化药药物急性毒性研究技术指导原则化药药物急性毒性研究技术指导原则中药、天然药物急性毒性研究技术指导原则中药、天然药物急性毒性研究技术指导原则急性毒性试验急性毒性试验2021/5/1837观察时间及指标观察时间及指标 急性毒性观察为全程观察急性毒性观察为全程观察时间为时间为14天。以便能观察到毒性指征出现天。以便能观察到毒性指征出现的时间及其恢复时间，死亡时间等的时间及其恢复时间，死亡时间等指标包括一般指标、死亡、体重变化等指标包括一般指标、死亡、体重变化等急性毒性试验急性毒性试验2021/5/1838观察时间及指标观察时间及指标 记录所有死亡、临床症状，临床症状开始记录所有死亡、临床症状，临床症状开始的时间、严重程度、持续时间、是否可逆的时间、严重程度、持续时间、是否可逆对于所有的动物均应进行大体解剖对于所有的动物均应进行大体解剖任何器官出现体积、颜色、纹理改变时，任何器官出现体积、颜色、纹理改变时，均应记录并进行组织病理学检查均应记录并进行组织病理学检查 急性毒性试验急性毒性试验2021/5/1839数据分析及评价数据分析及评价判断每种反应的量效关系及随时间的变化判断每种反应的量效关系及随时间的变化判断各种反应可能涉及的器官、组织或系统等，根据病理判断各种反应可能涉及的器官、组织或系统等，根据病理结果，初步判断毒性靶器官结果，初步判断毒性靶器官判断动物对受试物的耐受性、最大无反应剂量、最小毒性判断动物对受试物的耐受性、最大无反应剂量、最小毒性反应剂量、近似致死剂量等，初步判断药物安全范围反应剂量、近似致死剂量等，初步判断药物安全范围对于需要测定对于需要测定LD50值的药物，采用合理的统计学方法求值的药物，采用合理的统计学方法求算算LD50值值急性毒性试验急性毒性试验2021/5/1840动物种属动物种属“一般应选用一种啮齿类动物加一种非啮一般应选用一种啮齿类动物加一种非啮齿类动物进行急性毒性试验。若未采用非齿类动物进行急性毒性试验。若未采用非啮齿类动物进行急性毒性试验，应阐明其啮齿类动物进行急性毒性试验，应阐明其合理性合理性”急性毒性试验急性毒性试验2021/5/1841动物种属动物种属啮齿类与非啮齿类对药物的敏感性明显不同啮齿类与非啮齿类对药物的敏感性明显不同研究证实非啮齿类与人体的相关性一般更好研究证实非啮齿类与人体的相关性一般更好从代谢的角度考虑，非啮齿类可能为更敏感动物，且从反映从代谢的角度考虑，非啮齿类可能为更敏感动物，且从反映药品安全性特点角度考虑非啮齿类可能更敏感药品安全性特点角度考虑非啮齿类可能更敏感国外在急性毒性试验前往往已完成了非啮齿类动物数日（国外在急性毒性试验前往往已完成了非啮齿类动物数日（3-5日）重复给药的剂量探索试验。即已反映了非啮齿类的急日）重复给药的剂量探索试验。即已反映了非啮齿类的急性毒性。而从我国实际情况来看，还有些差距性毒性。而从我国实际情况来看，还有些差距急性毒性试验急性毒性试验2021/5/1842试验方法试验方法近似致死剂量法近似致死剂量法 最大给药量法最大给药量法固定剂量法（固定剂量法（Fixed-dose procedure）上下法（阶梯法，序贯法，上下法（阶梯法，序贯法，Up and down method）累积剂量设计法（金字塔法，累积剂量设计法（金字塔法，Pyramiding dosage design）半数致死量法半数致死量法急性毒性试验急性毒性试验2021/5/1843进展进展LD50值的不确定性值的不确定性o试验结果数学处理后计算产生的一个数值试验结果数学处理后计算产生的一个数值o不同试验对于同一药物所得出的结果差别不同试验对于同一药物所得出的结果差别较大，可达较大，可达2.44 8.38倍倍o从依达拉奉和阿德福韦酯的研究结果可以从依达拉奉和阿德福韦酯的研究结果可以得出类似结论得出类似结论急性毒性试验急性毒性试验2021/5/1844昆明种小鼠中依达拉奉与阿德福韦酯不同给药途径的昆明种小鼠中依达拉奉与阿德福韦酯不同给药途径的LD50值值急性毒性试验急性毒性试验给药途径给药途径范围（范围（mg/kg）倍数倍数依达拉奉依达拉奉静脉注射（静脉注射（n=68）321-7302.27腹腔注射（腹腔注射（n=26）492-10742.18经口给药（经口给药（n=24）894-25502.85阿德福韦酯阿德福韦酯腹腔注射（腹腔注射（n=25）195-12786.55经口给药（经口给药（n=25）704 50007.10数据来源于数据来源于2000 2002年申报资料，有些仅进行了其中年申报资料，有些仅进行了其中1种或种或2种给药途径的种给药途径的SDT。从。从当时国内当时国内GLP与研发状况分析，上述试验基本是在非与研发状况分析，上述试验基本是在非GLP条件下完成的，其中一些试验条件下完成的，其中一些试验可能是在同一试验单位进行。可能是在同一试验单位进行。n为试验次数。为试验次数。2021/5/1845急性毒性试验急性毒性试验2021/5/1846LD50值的不确定性值的不确定性导致这种不确定的原因可能包括但不仅限于导致这种不确定的原因可能包括但不仅限于o生物学不确定性的存在生物学不确定性的存在o动物品质差异动物品质差异o试验条件差异试验条件差异o受试物制备的差异，如浓度、溶剂等受试物制备的差异，如浓度、溶剂等o给药体积和给药速度差异，特别是注射途径时，给给药体积和给药速度差异，特别是注射途径时，给药速度是影响毒性表现重要因素药速度是影响毒性表现重要因素急性毒性试验急性毒性试验2021/5/1847LD50值的不确定性值的不确定性意义意义o如果以如果以LD50值为参考进行后续非临床或临床剂量设值为参考进行后续非临床或临床剂量设计的精确计算，可能存在风险计的精确计算，可能存在风险o上述结果提示在同一动物种属中多次试验获得相同上述结果提示在同一动物种属中多次试验获得相同LD50值的几率很小，文献比较的意义很小值的几率很小，文献比较的意义很小o试图通过测定试图通过测定LD50来确定不同来源、不同批次、不来确定不同来源、不同批次、不同生产工艺、不同杂质含量的同一化合物的毒性，科同生产工艺、不同杂质含量的同一化合物的毒性，科学性值得商榷学性值得商榷急性毒性试验急性毒性试验2021/5/1848总结总结两种给药途径两种给药途径两种动物（啮齿两种动物（啮齿+非啮齿）非啮齿）以适当的间隔至少观察以适当的间隔至少观察14天天全程观察全程观察大体剖检及组织病理学检查大体剖检及组织病理学检查选择合适的试验方法及统计学方法选择合适的试验方法及统计学方法急性毒性试验急性毒性试验2021/5/18492005年发布年发布中药、天然药物急性毒性研究技术指导原则中药、天然药物急性毒性研究技术指导原则化药药物急性毒性研究技术指导原则化药药物急性毒性研究技术指导原则计划修订、合并、补充：计划修订、合并、补充：药物单次给药毒性研究技术指导原则药物单次给药毒性研究技术指导原则急性毒性试验急性毒性试验2021/5/1850概念概念通过动物重复给药试验表征受试物的毒性通过动物重复给药试验表征受试物的毒性作用作用Chronic Toxicity Study 时间概念，相对性时间概念，相对性Repeated Dose Toxicity Study 给药次数给药次数o重复给药毒性试验重复给药毒性试验o重复剂量毒性试验（重复剂量毒性试验（）长期毒性试验长期毒性试验2021/5/1851长期毒性试验长期毒性试验Repeated Dose Toxicity Study王庆利王庆利 张若明张若明 药品审评中心药理毒理学部药品审评中心药理毒理学部2021/5/1852是物非临床安全性评价的核心内容是物非临床安全性评价的核心内容与急性毒性、生殖毒性以及致癌性等毒理学研究有与急性毒性、生殖毒性以及致癌性等毒理学研究有着密切的联系，是药物从药学研究进入临床试验的着密切的联系，是药物从药学研究进入临床试验的重要环节重要环节通过重复给药动物试验表征受试物的毒性作用通过重复给药动物试验表征受试物的毒性作用预测其可能对人体产生的不良反应，降低临床试验预测其可能对人体产生的不良反应，降低临床试验受试者和药品上市后使用人群的用药风险受试者和药品上市后使用人群的用药风险长期毒性试验长期毒性试验2021/5/1853预测受试物可能引起的临床不良反应预测受试物可能引起的临床不良反应性质、程度、剂量反应和时间反应、可逆性性质、程度、剂量反应和时间反应、可逆性判断受试物反复给药的毒性靶器官或靶组织判断受试物反复给药的毒性靶器官或靶组织推测临床试验的起始剂量和重复用药的安全剂量范围推测临床试验的起始剂量和重复用药的安全剂量范围提示临床试验中需重点监测的指标提示临床试验中需重点监测的指标还可以为临床试验中的解毒或解救措施提供参考还可以为临床试验中的解毒或解救措施提供参考最终为临床试验和临床用药服务最终为临床试验和临床用药服务长期毒性试验长期毒性试验2021/5/1854受试物受试物制备工艺稳定、符合临床试验用质量标准规定制备工艺稳定、符合临床试验用质量标准规定o受试物应注明名称、来源、批号、含量（或规格）、受试物应注明名称、来源、批号、含量（或规格）、保存条件及配制方法等，并附有研制单位的自检报告。保存条件及配制方法等，并附有研制单位的自检报告。o所用辅料、溶媒等应注明批号、规格和生产厂家，所用辅料、溶媒等应注明批号、规格和生产厂家，并符合试验要求。并符合试验要求。在药物开发的过程中，若受试物的制备工艺发生可能影在药物开发的过程中，若受试物的制备工艺发生可能影响其安全性的变化，应进行相应的安全性研究响其安全性的变化，应进行相应的安全性研究长期毒性试验长期毒性试验2021/5/1855实验动物实验动物一般情况下，创新药的长期毒性试验采用一般情况下，创新药的长期毒性试验采用两种实验动物两种实验动物o一种啮齿类一种非啮齿类一种啮齿类一种非啮齿类长期毒性试验长期毒性试验2021/5/1856实验动物实验动物理想的实验动物理想的实验动物o对受试物的生物转化与人体相近对受试物的生物转化与人体相近-相关性相关性o对受试物敏感对受试物敏感o已有大量历史对照数据已有大量历史对照数据长期毒性试验长期毒性试验2021/5/1857实验动物实验动物国内现状，大多数试验开始时，无法判断不同种系实验国内现状，大多数试验开始时，无法判断不同种系实验动物和人体对受试物的生物转化的一致性动物和人体对受试物的生物转化的一致性o通常采用大鼠和通常采用大鼠和Beagle犬或猴犬或猴某些特殊结构的受试物应选用特殊种属或品系的动物进某些特殊结构的受试物应选用特殊种属或品系的动物进行长期毒性试验行长期毒性试验必要时可选用疾病模型动物进行试验必要时可选用疾病模型动物进行试验在长期毒性试验前可采用体外试验体系对实验动物的种在长期毒性试验前可采用体外试验体系对实验动物的种属或品系进行筛选属或品系进行筛选长期毒性试验长期毒性试验2021/5/1858长期毒性试验长期毒性试验2021/5/1859试验动物试验动物健康、未孕，动物体重差异应在平均体重的健康、未孕，动物体重差异应在平均体重的20之内之内应符合国家有关规定的等级要求应符合国家有关规定的等级要求来源、品系、遗传背景清楚，并具有实验动物质量合格证来源、品系、遗传背景清楚，并具有实验动物质量合格证应根据研究期限的长短和受试物临床应用的患者群确定动应根据研究期限的长短和受试物临床应用的患者群确定动物的年龄物的年龄o成年、幼年成年、幼年一般大鼠为一般大鼠为69周龄，周龄，Beagle犬为犬为612月龄月龄长期毒性试验长期毒性试验2021/5/1860试验动物试验动物一般情况下，雌雄各半一般情况下，雌雄各半每组动物数量应能够满足试验结果的分析和评价每组动物数量应能够满足试验结果的分析和评价的需要的需要o一般大鼠为雌、雄各一般大鼠为雌、雄各1030只只oBeagle犬或猴为雌、雄各犬或猴为雌、雄各36只只长期毒性试验长期毒性试验2021/5/1861给药方案给药方案给药剂量给药剂量高、中、低三个剂量给药组高、中、低三个剂量给药组o高剂量原则上应使动物产生明显的毒性反应，甚至出现个别动物死亡高剂量原则上应使动物产生明显的毒性反应，甚至出现个别动物死亡o低剂量原则上应高于动物药效的等效剂量，并不使动物出现毒性反应低剂量原则上应高于动物药效的等效剂量，并不使动物出现毒性反应o为考察毒性反应剂量为考察毒性反应剂量-反应关系，应在高剂量和低剂量之间设立中剂量反应关系，应在高剂量和低剂量之间设立中剂量一个溶媒（或辅料）对照组一个溶媒（或辅料）对照组必要时空白对照组或阳性对照组必要时空白对照组或阳性对照组长期毒性试验长期毒性试验2021/5/1862给药方案给药方案给药途径给药途径o原则上应与临床用药途径一致，否则应说明原因。原则上应与临床用药途径一致，否则应说明原因。给药频率给药频率o原则上动物应每天给药原则上动物应每天给药o给药期限长（给药期限长（3个月或以上）的，每周至少药个月或以上）的，每周至少药6天天o特殊类型的受试物由于其毒性特点和临床给药方案特殊类型的受试物由于其毒性特点和临床给药方案等原因，应根据具体药物的特点设计给药频率等原因，应根据具体药物的特点设计给药频率长期毒性试验长期毒性试验2021/5/1863给药方案给药方案给药期限给药期限o根据与拟定临床研究方案、临床适应证根据与拟定临床研究方案、临床适应证和用药人群等确定和用药人群等确定o给药结束后应有一定时间的恢复期给药结束后应有一定时间的恢复期长期毒性试验长期毒性试验2021/5/1864给药方案给药方案给药期限给药期限o较短的毒性研究获得的信息可为较长的毒性研究设较短的毒性研究获得的信息可为较长的毒性研究设计提供给药剂量、给药频率等方面的参考计提供给药剂量、给药频率等方面的参考o临床试验中获得的信息有助于给药期限较长的动物临床试验中获得的信息有助于给药期限较长的动物毒性研究方案的设计，降低药物开发的风险毒性研究方案的设计，降低药物开发的风险o支持不同的临床研究或上市申请的不同给药期限的支持不同的临床研究或上市申请的不同给药期限的长期毒性试验的内容应完整、规范，对结果的分析评长期毒性试验的内容应完整、规范，对结果的分析评价应科学、合理价应科学、合理长期毒性试验长期毒性试验2021/5/1865长期毒性试验的给药期限（不含恢复期）长期毒性试验的给药期限（不含恢复期）长期毒性试验长期毒性试验临床疗程临床疗程啮齿类动物啮齿类动物 非啮齿类动物非啮齿类动物可以支持的临床试可以支持的临床试验阶段验阶段单次用药单次用药2周周2周周临床及生产临床及生产2周周1个月个月1个月个月临床及生产临床及生产2周周1个月个月1个月个月1个月个月II期期3个月个月3个月个月III期（及生产）期（及生产）3个月个月3个月个月3个月个月II期期6个月个月6个月个月III期（及生产）期（及生产）6个月个月6个月个月6个月个月II期期6个月个月9个月个月III期（及生产）期（及生产）6个月个月6个月个月9个月个月II期期6个月个月9个月个月III期（及生产）期（及生产）2021/5/1866检测指标检测指标除必需的检测指标外，应根据受试物的特点，除必需的检测指标外，应根据受试物的特点，有针对性有针对性地增加相应的检测地增加相应的检测o血液学指标血液学指标10项项o 血液学生化学指标血液学生化学指标16项项o 尿液分析尿液分析6项项 o 组织病理学检查：啮齿类动物组织病理学检查：啮齿类动物30项项o 非啮齿类动物非啮齿类动物33项项长期毒性试验长期毒性试验2021/5/1867毒物代谢动力学（简称毒代动力学）毒物代谢动力学（简称毒代动力学）系指结合毒性试验进行的考察药物系统暴露的代系指结合毒性试验进行的考察药物系统暴露的代谢动力学研究谢动力学研究描述实验动物的系统暴露与暴露剂量、暴露时间描述实验动物的系统暴露与暴露剂量、暴露时间和毒理学结果之间的关系和毒理学结果之间的关系小动物试验设立卫星组专门进行毒代动力学试验小动物试验设立卫星组专门进行毒代动力学试验毒理学试验应进行毒代动力学检测毒理学试验应进行毒代动力学检测长期毒性试验长期毒性试验2021/5/1868结果分析评价结果分析评价动物是否发生毒性反应动物是否发生毒性反应描述毒性反应的性质和程度描述毒性反应的性质和程度o毒性起始时间、程度、持续时间以及可逆性等毒性起始时间、程度、持续时间以及可逆性等靶器官靶器官确定安全范围确定安全范围 NOAEL探讨可能的毒性作用机制探讨可能的毒性作用机制长期毒性试验长期毒性试验2021/5/1869结果分析评价结果分析评价均值数据和单个数据均值数据和单个数据o啮齿类动物啮齿类动物组均值的意义通常大于单个动物数据的意义组均值的意义通常大于单个动物数据的意义实验室历史背景数据和文献数据可以为结果的分析提供参考实验室历史背景数据和文献数据可以为结果的分析提供参考o非啮齿类动物非啮齿类动物单个动物的试验数据往往具有重要的毒理学意义单个动物的试验数据往往具有重要的毒理学意义须与给药前数据、对照组数据和实验室历史背景数据进行多须与给药前数据、对照组数据和实验室历史背景数据进行多重比较重比较长期毒性试验长期毒性试验2021/5/1870结果分析评价结果分析评价统计学意义与生物学意义统计学意义与生物学意义o正确利用统计学假设检验有助于确定试验结果的生正确利用统计学假设检验有助于确定试验结果的生物学意义，但具有统计学意义并不一定代表具有生物物学意义，但具有统计学意义并不一定代表具有生物学意义学意义o在判断生物学意义时应考虑到参数变化的剂量在判断生物学意义时应考虑到参数变化的剂量-反应反应关系、其他相关参数的改变、与历史背景数据的比较关系、其他相关参数的改变、与历史背景数据的比较o重视组织病理学检查结果重视组织病理学检查结果长期毒性试验长期毒性试验2021/5/1871毒性反应的临床意义毒性反应的临床意义动物长期毒性试验的结果一般不会完全再现于人动物长期毒性试验的结果一般不会完全再现于人体临床试验体临床试验如果没有试验或文献依据证明受试物对动物的毒如果没有试验或文献依据证明受试物对动物的毒性反应与人体无关，在进行药物评价时必须首先性反应与人体无关，在进行药物评价时必须首先假设人最为敏感，长期毒性试验中动物的毒性反假设人最为敏感，长期毒性试验中动物的毒性反应将会在临床试验中再现应将会在临床试验中再现长期毒性试验长期毒性试验2021/5/1872动物试验的局限性动物试验的局限性不同物种、同物种不同种属或个体之间对于某一不同物种、同物种不同种属或个体之间对于