第五章苯丙素类化合物.pptx

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,#,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,第五章苯丙素类化合物,第一节 概 述,1,第二节 简单苯丙素类,2,第三节 香 豆 素 类,3,第四节 木 脂 素 类,4,苯丙素,就是指基本母核具有一个或几个,C,6,-C,3,单元得天然有机化合物类群,。,包括苯丙烯、苯丙醇、苯丙酸及其缩合酯、香豆素、木脂素、木质素和黄酮等。,香豆素类(1分子C6 C3 单元),木脂素类(2分子C6 C3 单元),木质素类(多分子C6 C3 单元),黄酮类(C6 C3 C6 单元,另章介绍),苯丙酸类(1分子C6 C3单元),存在:,这类成分有单独存在得,也有以多个单位聚合存在得,其存在形式多数为游离型,少数成苷。分子量较小得苯丙素类化合物大多就是亲脂性和有挥发性得,常与单萜、倍半萜等共存于挥发油中。具有抗菌、健胃、理气等多种功能。,丁香苷(丁香)-止血,绿原酸(茵陈)-利胆,苯丙素类来源于苯丙氨酸和酪氨酸,然后脱氨生成桂皮酸得衍生物,多数天然芳香族化合物由此生物合成途径而来。,桂皮酸(肉桂酸),生物合成途径:,苯丙素类化合物生物合成途径,葡萄糖代谢,莽草酸,桂皮酸途径,苯丙氨酸和酪氨酸,咖啡酸,对羟基桂皮酸,对羟基桂皮酸苷,咖啡酸,对羟基桂皮酸,对羟基桂皮酸苷,阿魏酸,邻羟桂皮酸苷,苯丙烯类,松柏醇,伞形花内酯,新木脂素类,木质素,倍半木脂素类,丙烯基,烯丙基,香豆素类,木脂素类,苯丙素类化合物生物合成途径,大家有疑问的，可以询问和交流,可以互相讨论下，但要小声点,苯丙素类化合物生物合成途径,苯丙素类化合物生物合成途径,本 章 内 容,第一节 苯丙酸类,第二节 香 豆 素,第三节 木 脂 素,第二节 简单苯丙素类,一、简单苯丙素类得结构与分类,(一)苯丙烯类,丁香酚 -细辛醚 -细辛醚,(二),苯丙醇类,松柏醇,(三)苯丙醛类,桂皮醛,(四)苯丙酸类,苯丙酸及其酯类就是重要得简单苯丙素类化合物。如,咖啡酸 阿魏酸,丹参素(活血化瘀)绿原酸,(利胆,),存在形式:,苯丙酸常与不同得醇、氨基酸、糖、有机酸等结合成酯,多有较强得生理活性。,绿原酸(茵陈、,苎麻、金银花,)-利胆,3,4-二咖啡酰基奎宁酸(金银花)-抗菌,荷包花苷A(南沙参)-抗血小板聚集成分,菜蓟素(菜蓟)-利胆保肝,松柏苷(日本蛇菰)-抗组胺释放活性,Rosmarinic acid(粗糠树)-止泻,绿原酸(茵陈)-利胆,3-咖啡酰奎宁酸,松柏苷(日本蛇菰)-抗组胺释放活性,二、提取分离,苯丙酸类衍生物具有一定得水溶性,且常与其她一些酚酸、鞣质、黄酮苷等混在一起,难以分离。可用醇提或丙酮水提,再用纤维素、硅胶、大孔树脂或聚酰胺树脂等色谱方法进行分离。,依其极性大小和溶解性不同,一般用有机溶剂或水提取分离,水蒸汽蒸馏法提取:苯丙烯、苯丙醛及苯丙酸得简单酯类衍生物多具有挥发性,碱提酸沉法:苯丙酸衍生物,例如 兴安升麻中咖啡酸、阿魏酸、异阿魏酸得提取、分离。,三、苯丙酸类化合物得显色剂,1%2%FeCl,3,甲醇液,(重氮化磺胺酸),1%NaNO,2,-10%HAc,HNO,3,+HNO,2,+HgNO,3,+HgNO,2,滴加到样品液中,显色,样品与3%Na,2,CO,3,溶液共热3min,冷却后滴加该试剂,溶液显红色。,喷于样品点上,干燥后再用0、5mol/L,得,NaOH甲醇溶液显色,滴加到样品液中,显红色,四、中药化合物-丹参(唇形科鼠尾草属),丹参素甲,丹参素丙,丹参素乙,3,4-二羟基苯甲醛,本节要求,1、掌握苯丙酸类化合物得基本母核得结构特征。,2、了解丹参素甲、乙、丙得结构。,第二节 香 豆 素(Coumarin),香豆素就是一类具有苯骈,-,吡喃酮环母核结构得内酯类化合物,由顺式邻羟基桂皮酸分子内脱水而得。,取代基:羟基、烷氧基、苯基、异戊烯基等,绝大多数香豆素在C7位都有含氧官能团存在,因此,7-羟香豆素可以认为就是香豆素类成分得母体。,香豆素广泛存在于伞形科、芸香科、豆科、菊科、茄科、瑞香科等植物以及微生物代谢产物中。与其生源相近得桂皮酸、黄酮类、木脂素等常伴生。多数存在于植物得花、茎、叶、果中。尤以幼嫩得叶芽中含量高。香豆素类在生物体内得存在形式,或游离状态,或与糖结合成苷。,香草木樨苷,伞形花内酯,香豆素类成分在植物体内低浓度时刺激发芽和生长,高浓度时抑制发芽和生长。香豆素类如作用于人体,则具有多方面得生物活性。,邻羟基桂皮酸苷,七叶内酯(秦皮),-治疗痢疾,亮菌甲素(假密环菌代谢物),-治疗胆囊炎,补骨脂内酯(补骨脂),-抗结核菌,Calanolide A(胡桐中),-抗爱滋病,一、结构与分类,香豆素得基本母核为苯骈,-吡喃酮,-吡喃酮环上有无取代,7-位羟基就是否和6,8位取代异戊烯基缩合形成呋喃环、吡喃环,。根据其取代基及连接方式不同,常把香豆素分为四类:,简单香豆素类,呋喃香豆素类,吡喃香豆素类,其她香豆素类,(一)简单香豆素类,仅在苯核上具有取代基得香豆素,绝大多数香豆素在7-位都有含氧官能团存在。,R=,-OH,-OCH,3,-CH,2,CH=C(CH,3,),2,-COCH=C(CH,3,),2,伞形花内酯(软毛独活、阿魏),七叶苷(秦皮),当归内酯(当归),蛇床子素(蛇床子),(二)呋喃香豆素,香豆素核上C,6,或C,8,位得异戊烯基与邻位酚羟基环合成呋喃环,成环后常伴随着降解失去三个碳原子。,1、直线型 2、角型,6,7,8,花椒毒内酯(牛尾独活),芸香素,虎耳草素(牛尾独活),回芹内酯,(三)吡喃香豆素,由香豆素苯环上C,6,和C,8,位异戊烯基和邻位羟基环合形成2,2-二甲基-吡喃环结构。也分线型(6,7环合)与角型(7,8环合)。,这一类天然产物并不多见。,线型,角型,美花椒内酯,前胡香豆素A,别美花椒内酯,环合反应得形成:,体内由酶主宰反应。,体外实验,碱性条件(OH-)呋喃环。,酸性条件(,H+,)吡喃环。,(四)其她香豆素,指,-,吡喃酮环上有取代基得香豆素类。还包括二聚体和三聚体。,C,3,、,C,4,上常有取代基:苯基、羟基、异戊烯基等。,黄檀内酯,海棠果内酯,Kotamin(,二聚体,),当C,4,C,7,上连有羟基时,易发生互变异构。,4,7-二羟基香豆素,2,7-而羟色酮,(一)性状,游离状态,结晶形固体,有一定熔点;,大多具有香气;具有升华性质,分子量小得有挥发性(可随水蒸汽蒸出),UV,下显,蓝色荧光,成苷,大多无香味、无挥发性、不能升华。,二、理化性质,(二)溶解性,游离,能溶于沸,H,2,O,不溶或难溶冷,H,2,O,可溶,MeOH,、,EtOH,、,CHCl,3,和乙醚等溶剂。,因含,Ar-OH,故可溶于碱水中。,成苷,溶于,H,2,O,、,OH,-,/H,2,O,、,MeOH,、,EtOH,等。,难溶极性小得有机溶剂。,(三)化学性质,1、内酯得碱水解,香豆素具有内酯结构,与稀碱液作用可水解开环,形成顺式邻羟基桂皮酸盐得,黄色溶液,。,或UV照射,欲获得顺式邻羟桂皮酸衍生物得方法:,1,、,C,8,位取代基得适当位置上有,C=O,、,C=C,、环氧等结构者,可与水解新生成得酚羟基起缔合、加成等作用,可阻碍内酯得恢复。,异当归内酯,3-异戊烯酰-4,6-二甲氧基顺邻桂皮酸,碱水解反应得难易程度:,一般香豆素,7-甲氧基香豆素,7-羟基香豆素,易,难,其她酯基得碱水解反应,芳环,苄基碳上得酯基,极不稳定,碱水解后易生成异构化得醇。,2、,与酸反应,环合反应,异戊烯基与邻酚羟基环合,形成吡喃环或呋喃环。,中间体生成叔(仲)碳正离子,二氢吡喃香豆素,形成环得大小决定于中间体碳正离子得稳定性,叔碳正离子,仲碳正离子,伯碳正离子,稳定,不,稳定,应用:,环合试验可以确定酚羟基和异戊烯基间得相互位置,注意:,不宜使用,浓酸,否则会发生重排反应,稀醇醚键得开裂,(五)显色反应,1、异羟,肟,酸铁反应,:,香豆素类成分具有内酯结构,在碱性条件下开环,与盐酸羟胺缩合生成异羟,肟,酸,在酸性条件下再与Fe,3+,络合而显红色。,2、酚OH反应,:,与三氯化铁溶液反应产生绿色至墨绿色沉淀。,3、Gibbs反应(2,6二溴苯醌氯亚胺试剂),香豆素类在碱性条件下内酯环水解生成酚OH得对位无取代基,即6位无取代,可与Gibbs试剂起反应而显蓝色。,4、Emerson反应(4-氨基安替比林和铁氰化钾),与Gibbs相似,酚OH对位无取代时,可与Emerson试剂反应,生成红色。,用化学方法区别,:,A B,1、Molish试剂A阳性B阴性,2、Giibs试剂A阴性B阳性,(六)双键得加成反应,香豆素成分在控制条件下氢化,非共轭得侧链双键最先被氢化,然后就是和苯环共轭得呋喃环或吡喃环上得双键氢化,最后才就是C,3,-C,4,双键氢化。,另C,3,-C,4,双键可与溴加成生成3,4-二溴加成衍生物,再经过碱处理脱去1分子溴化氢,生成一溴香豆素衍生物。,氧化剂氧化能力不同,生成得产物也不同,KMnO,4,往往使香豆素类C,3,-C,4,双键断裂而生成水杨酸得衍生物。,铬酸一般只氧化侧链,也能氧化苯环为醌式结构,但不破坏-吡喃酮环。,臭氧氧化首先发生在侧链双键,然后就是呋喃环或吡喃环上得双键,最后才就是C,3,-C,4,双键。,这些反应曾被用于香豆素得结构确定。,(七)氧化反应,三、香豆素类得提取和分离,(一)香豆素类得提取,1、溶剂提取法,可用甲醇、乙醇、丙酮、乙醚等溶剂提取。,提取方法可先用亲脂性溶剂提出极性小得成分,再用醇或水提出极性大得部分。,也可先用醇或水提取,然后再用溶剂或大孔吸附树脂分离脂溶性和水溶性成分。,2、水蒸气蒸馏,小分子游离香豆素类成分有挥发性,可采用水蒸气蒸馏法提取。该法受热温度高、时间长,有时可能引起结构变化,现在已少用。,3、碱溶酸沉法:,香豆素类具有内酯结构,能溶于稀碱液而和其她中性成分分离,碱液酸化后内酯环合,香豆素类成分即可游离析出,也可用乙醚等有机溶剂萃取得到。,因香豆素类开环产物顺式邻羟基桂皮酸在碱液中长时间加热会异构化为反式邻羟基桂皮酸,而不能环合。因此必须控制碱得浓度和加热时间。,一些对酸、碱敏感得香豆素类成分不能用碱溶酸沉法提取,如:8-位具有酰基则碱开环后不能酸化闭环;,侧链酯基易被碱水解;,具有烯丙醚或邻二醇结构得会在酸作用下水解或结构重排,而得不到原化合物。,(一)提取,药,材,醇提液,水溶液,石油醚,苯,乙醚,乙酸乙酯,不同浓度,EtOH,回收溶剂,加水(或制成浸膏),有机溶剂萃取,(二)分离,1、,酸碱分离法,依据,内酯遇碱能皂化,加酸能恢复得性质。,注意:对酸碱敏感得香豆素不可用。,2、水蒸气蒸馏法,小分子得香豆素具有挥发性,可采用水蒸气蒸馏法提取和分离。,注意:受热时间不宜过长,否则结构可变。,3、,层析方法,吸附剂,硅胶、中性氧化铝、离子交换树 脂、大孔吸附树脂、纤维素等;,洗脱剂,石油醚:乙醚;正己烷:乙酸乙酯;,显,色,可观察荧光,注意:硅胶具有酸性,对一些对酸敏感得香豆素分离时有可能产生次生物质。,制备TLC,HPLC,2、Angelica keiskei,八丈草,长寿草,还阳草,明日草,传说秦始皇命令徐褔到东方寻找长生不老药,所找到得就就是明日草。原产于日本八丈岛,为伞形科二年生植物。主要功效就是强身健体,同时也可用于治疗高血压糖尿病神经痛妇科病等。,含香豆素中药提取分离实例,1、独活,常用得祛风除湿及散寒止痛中药,商品独活种类很多,用量较大得为川独活,主含香豆素类化合物。,干燥根,50%甲醇温提,药渣,提取液,减压蒸去醇,溶剂,水溶液,乙酸乙酯萃取除去脂溶性杂质,乙酸乙酯液,水溶液,流经732(H)强酸型阳离子交换树脂,除去碱性成分,流出液,DA-201大孔吸附树脂,依次用50%乙醇和95%乙醇洗脱,独活总香豆素,硅胶柱,单体I,单体II,干燥根,乙醚提取后浓缩,浸膏,石油醚温提去脂,溶液,药渣,乙醚液,水溶液,溶于乙醚,5%Na,2,HCO,3,抽提,酚性成分,乙醚提取,水溶液,红褐色,油状物,乙醚液,浓缩,减压蒸馏,当归酸,3%NaOH萃取,水溶液,乙醚提取,红褐色糖浆,酸化,柱层析,白芷内酯,佛手内酯,花椒内酯,乙醚液,浓缩,黄色油状物,柱层析,补骨内酯,酸化,酸性成分,四、香豆素类化合物检识,(一)理化检识,1、荧光:,可见光下,无色或浅黄色结晶;,紫外光下,一般显蓝色或紫色。,7-羟基蓝色荧光较强,加碱后更强。羟基醚化荧光减弱。,呋喃香豆素荧光较弱。,荧光和结构得关系目前尚不清楚。,2、显色反应,异羟肟酸铁反应,(识别内酯),与三氯化铁试剂反应,(识别酚羟基),红色,具有酚羟基得香豆素均能在酸性条件下与FeCl,3,反应产生颜色,颜色得深浅与酚羟基得数目和位置有关。,异羟肟酸,与Gibbs试剂及Emerson试剂反应,(有游离酚羟基,且其对位无取代基),试剂:,Gibb2,6-,二氯,(,溴,),苯醌氯亚胺,Emerson,氨基安替比林和铁氰化钾,2,6-二溴苯醌氯亚胺,蓝色,4-氨基安替比林,红色,(二)色谱检识,薄层色谱法,吸附剂:硅胶,规律:母核上羟基取代数目愈多,则R,f,值愈小;羟基变为甲氧基,则R,f,值增大。,展开剂:,游离香豆素:正已烷:乙酸乙酯(5:11:1),氯仿:丙酮(9:1),苷类:氯仿-甲醇不同比例,显色:紫外光下观察荧光或使用显色剂,亮菌甲素,HCl存在下:254nm,370nm,KOH存在下:284nm,427nm,中性溶液中:254nm,283nm,370nm,427nm,本节要求,1、掌握香豆素得结构类型、理化性质及提取分离特征。,第三节 木 脂 素,(lignans),木脂素就是一类由苯丙素单元氧化聚合而成得天然产物,因广泛存在于植物得木质部和树脂中,并在开始析出时呈树脂状而得名,。,通常指其二聚物,少数为三聚物和四聚物。三聚体称为倍半木,三聚体称为倍半木脂素(sesquilignan),四聚体称为二木脂素(dilignan),木脂素多数就是游离得,也有少数就是以苷得形式存在。结构中多具有羟基、甲氧基、羧基、内酯基等取代基,大多数还具有旋光活性。,牛蒡子苷,叶下珠脂素,如:,小檗科鬼臼属鬼臼中所含得鬼臼毒素、去甲鬼臼毒素、去氧鬼臼毒素等以及她们得苷类有抑制癌细胞增殖得作用,毒性大,进行结构修饰后,得到etoposide 抗癌活性明显增加,且毒副作用降低。,鬼臼毒素,etoposide,木脂素得C6-C3骨架得连接方式如下:,组成木脂素得单位有四种:,1、,桂皮酸(,cinnamic acid,),偶为桂皮醛(,cinnamaldehyde,),2、,桂皮醇(,cinnamyl alcohol,),3、,丙烯苯(,propenyl benzene,),4、,烯丙苯(,allyl benzene,),二、结构和分类,(按化学结构分),(一)简单木脂素,(二)单环氧木脂素,(三)木脂内酯,(四)环木脂素,(五)环木脂内酯,(六)双环氧木脂素,(七)联苯环辛烯型木脂素,(八)联苯型木脂素,(九)其她,简单木脂素,二芳基丁烷类(dibenzylbutanes),基本骨架,两分子苯丙素以侧链得,-C原子相连,就是其她类型木脂素得生源前体。,一、常见木质素得结构类型,叶下珠脂素(珠子草),去甲二氢愈创木脂酸,(愈创木树脂),二芳基丁烷类,四氢呋喃类,单环氧木脂素,7-O-7 7-O-9 9-O-9,基本骨架,(-)-galbacin,橄榄脂素,Cubebin,荜澄茄素,四氢呋喃类,加尔巴新,木脂内酯就是由单环氧木脂素中得四氢呋喃环氧化成内酯环,她常与其去氢化合物共存于同一植物中、,(三)木脂内酯,二芳基丁内酯类,单去氢木脂内酯,双去氢木脂内酯,木脂内酯,(四)环木脂素,芳基萘类,由简单木脂素环合而成得环木脂素,由苯代四氢萘、苯代二氢萘及苯代萘等结构类型,自然界中第一种类型最多。,苯代四氢萘,苯代二氢萘,苯代萘,中国紫杉中异紫杉脂素和去氧鬼臼毒脂素葡萄糖酯苷都具有苯代四氢萘得结构。,异紫杉脂素,去氧鬼臼毒脂素葡萄糖酯苷,(五)环木脂内酯,由环木脂素C9-C9间环合成内酯环即环木脂内酯,按其内酯环上羰基得取向分为上向和下向两种类型。,4-苯代2,3-萘内酯,1-苯代2,3-萘内酯,鬼臼中环木脂内酯结构,l-鬼臼毒脂素苷,异鬼臼脂酮为苯代四氢萘型环木脂内酯。,l-鬼臼毒脂素苷,(六)双环氧木脂素,双四氢呋喃类,由两分子苯丙素侧链相互连接形成两个环氧结构得一类木脂素,结构中有顺式连接得双骈四氢呋喃环。常见4种光学异构体。,l-芝麻脂素,(七)联苯环辛烯型木脂素,分子中有联苯结构,又具有联苯结构与侧链合成得八元环状结构。,(八)联苯型木脂素,厚朴树皮中分到得厚朴酚和日本厚朴树皮中得和厚朴酚就是早期发现得新木质素,为联苯型结构。,两个苯丙素得两个苯环3-3直接相连而成。,厚朴酚,和厚朴酚,(八)联苯类,厚朴酚,和厚朴酚,九、其她类木脂素,苯骈呋喃类(benzofurans),苯骈呋喃及其二氢、四氢和六氢衍生物。,eupomatene,海风藤酮,7,8,9,7,8,9,新木脂素类,双环辛烷类(bicyclo3,2,1octanes),guaianin,macrophyllin,7,8,9,杂木脂素类,苯骈二氧六环类(benzodioxanes),两分子苯丙素通过氧桥连接,形成二氧六环结构。,优西得灵,猫眼草素,7,8,9,杂木脂素类,倍半木脂素类(sesquilignans),Lappaol A,拉帕酚A,7,8,9,7,8,9,7,8,9,二木脂素类(dilignans),Lappaol F,拉帕酚F,二、木脂素得理化性质,形态:多呈无色晶形,新木脂素不易结晶,溶解性:,游离,亲脂性,难溶于水,溶于苯、氯 仿、乙醚、乙醇等,成苷,水溶性增大,但易被酶和酸水解,挥发性:多数不挥发,少数有升华性质,旋光性:大多有光学活性。,对酸碱不稳定,遇酸易异构化。,d-芝麻脂素,(麻油),d-表芝麻脂素,右旋体,左旋体,这就是由于呋喃环上得氧原子与苄基相连,易于开环,重复闭环时,发生构型变化,。,表鬼臼毒素,表苦鬼臼毒素,鬼臼毒素,苦鬼臼毒素,抗癌必要结构:,3,4-顺式;,2,3-反式,矿酸不仅能使木脂素构型发生变化,改变旋光性质,影响其生物活性,而且还能引起某些木脂素,发生碳架重排,。,光照,也能使木脂素起氧化环合等反应而发生碳架变化。,galgravin,三、木脂素得提取与分离,提取:,游离得木脂素就是亲脂性得,易溶于三氯甲烷、乙醚等溶剂,在石油醚中溶解度极小。一般采用甲醇或丙酮提取后,浓缩成浸膏,依次用石油醚、乙醚、乙酸乙酯等萃取,再用色谱柱进一步分离纯化。,具有酚羟基或内酯结构得木脂素可按碱溶酸沉法提取。注意异构化。,1、溶剂法,游离木脂素就是亲脂性得,能溶于乙醚等低极性溶剂,在石油醚中溶解度比较小,。,若用溶解度更好得乙醇、丙酮等有机溶剂进行提取,也能得到较高得收率。,木脂素苷类一般较苷元亲水性强,可以用乙醇或乙酸乙酯等中高极性溶剂提取。,2、碱溶酸沉法,具有内酯结构得木脂素,可利用溶于碱液得性质,而与其她非皂化得亲脂性成分分离、,在应用碱液时要注意木脂素得异构化。尤其不适用于有旋光活性得木脂素,以免因异构化失去生理活性。,木脂素分离可采用溶剂萃取法、分级沉淀法、重结晶法、色谱分离法等,(1)吸附色谱法,吸附剂:硅胶或中性氧化铝,洗脱系统:石油醚乙醚、氯仿甲醇等,(2)分配色谱法(PC),固定相:滤纸浸以甲酰胺,流动相:苯,3、色谱法,常用色谱显色剂:,1、茴香醛浓硫酸试剂,110,加热5min,2、5%或10%磷钼酸乙醇溶液,120,加热至斑点出现。,3、10%硫酸,110,加热5min,4、三氯化锑试剂,100,加热10min,紫外光下观察,5、碘蒸气,熏后观察呈黄棕色,四、木脂素得检识1、理化检识,蓝绿色,木脂素分子中常有醇羟基、酚羟基、亚甲二氧基、羧基及内酯结构,因此也具有这些功能团得性质和反应。,1、三氯化铁试剂 检查酚羟基,2、Labat试剂(检查亚甲二氧基),没食子酸-浓硫酸,显蓝绿色,3、Ecgrine试剂 检查亚甲二氧基,变色酸-浓硫酸试剂,显蓝紫色、,Labat反应,具有亚甲二氧基得木脂素加浓硫酸,再加没食子酸,可产生蓝绿色。,换加变色酸,保温7080度,产生蓝紫色-Ecgrien反应。,H,2,SO,4,HCHO,蓝绿色,蓝紫色,2,色谱检识,同上,红花五味子-红花五味子(木兰科)得种子,盛产于我国云南、四川。曾从其种子中提得五味子酚,药理实验证明口服有明显得保肝降转氨酶得作用。除此之外还含有其她木脂素成分。,(五味子素)联苯环辛型,含木脂素中药提取分离实例,去氧五味子素,五味子酚,-去氧五味子素,北五味子醇乙,五味子中木脂素得提取分离,经浸泡得种子捣碎,95%乙醇热提,醇溶液,浓缩,浓缩液,冷冻,母液,结晶,硅胶柱层析分离,甲苯:乙酸乙酯(9:16:4),五味子酚,乙醇洗涤,五味子素,-五味子素,去氧五味子素,北五味子醇乙,窝儿七-为陕西民间用于清热、消炎、镇痛得一种草药,从其中分得鬼臼毒素、脱氢鬼臼毒素和山柰素。,脱氢鬼臼毒素,鬼臼毒素,芳基萘类,生药粉末,95%乙醇热提后浓缩,糖浆状物质,用水溶解,水液,树脂状物质,氯仿捏溶,黄色粉末,50%乙醇重结晶,不溶物,氯仿溶液,蒸干,残留物,苯-乙醇重结晶,山柰素,晶体,乙醇温热,不溶物,70%乙酸重结晶,乙醇液,鬼臼毒素,脱氢鬼臼毒素,乙醚提取并浓缩,蒸干,残留物,苯-乙醇重结晶,五、木脂素得结构鉴定,(一)化学反应,可根据化合物得结构特征,选择有反应特征得化学反应(水解反应、氧化反应),为结构鉴定提供信息。,1、,水解反应,适用于成酯、成苷类成分。,2、,氧化反应,(1),臭氧化,S,R,(2),费米盐氧化,(亚硝基亚硫酸钾),能将对位有氢原子得酚羟基氧化成对醌,以确证 酚羟基得位置,(3),高锰酸钾氧化,(4),脱亚甲基反应,(二)光谱方法,目前多用,1,H-NMR,和,13,C-NMR,谱。,根据化合物得,基本骨架,结构类型、碳数、对称性,取代基,含氧取代基、烷基,进行结构测定。,紫外光谱,鬼臼毒素,鬼臼毒素得最大吸收峰为,290294nm,283nm,270nm,B环得存在产生红移,用以区别芳基四氢萘、芳基二氢萘和芳基萘型木质素。,失水苦鬼臼脂素,失水苦鬼臼脂素,失水苦鬼臼脂素,去氢鬼臼毒素,290nm,同鬼臼毒素,311nm,红移,350nm,显著红移,263nm,266nm,323nm,256nm,(共轭体系延长),萘衍生物得吸收特性,核磁共振谱,1、氢谱,就是阐明木脂素结构得主要手段,对于芳基萘和联苯环辛烯类木脂素结构得确定提供一定得信息。,芳基萘类木脂素,内酯环向上(2-羰基化合物)和内酯环向 下(3-羰基化合物)得有关质子得化学位移明显不同。,R=CH,3,爵床脂素C,R=H 台湾脂素E,C=O得去屏蔽作用,使移向低场,4-Ar得屏蔽作用,使移向高场,2-羰基化合物,3-羰基化合物,1,2,3,4,联苯环辛烯类木脂素,Ar-H,CH,3,O,-O-CH,2,-O,-CH,3,、非芳环质子,溶剂位移特性:(确定-OCH,3,在芳环上得位置),依据:苯或氘代苯对芳香质子邻位得甲氧基有诱导位移。0、45,分子内NOE协助判断木质素得平面和立体结构,邻位碳上得质子产生强得NOE效应、,五味子乙素,NOE谱显示:,只有一个-OCH,3,与Ar-H产生NOE效应,只有该-OCH,3,有溶剂位移特性,五味子乙素原结构式,南五味子素,木脂素得波谱学研究实例,6、60(1H,s),6、48(1H,s),5、99(2H,br、s),5、67(1H,br、s),3、92(3H,s),3、89(3H,s),3、83(3H,s),3、65(3H,s),2、67(2H,d),1、92-2、20(2H,m),1、60(3H,s),1、08(3H,d),0、95(3H,d),1,H-NMR:,-OCH,2,O-,9-H,4-H,11-H,-OCH,3,6-H,7-H,8-H,CH,3,CO,17H,18H,NOE显示:,六、生物活性,抗肿瘤作用,小檗科鬼臼属植物含有各种鬼臼毒素类木脂素,均显示强得细胞毒活性,能显著抑制癌细胞得增殖。化学结构中C3和C1得构型对抗癌活性非常重要。,鬼臼毒素,苦鬼臼脂素,细胞毒活性降低,鬼臼毒素,表鬼臼毒素,细胞毒活性降低,