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单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,探究:培养液中酵母菌种群数量的变化,目的要求,1、学习利用血球计数板进行微生物计数的方法,2、实验,探究培养液中酵母菌种群数量的变化,3、注意样方法的应用,4、体会影响种群数量变化的因素,1,1、酵母菌的繁殖方式主要是:,2、酵母菌的呼吸方式是:,兼性厌氧(可进行有氧呼吸和无氧呼吸),回顾思考:,出芽生殖,2,例如:酵母菌的种群数量在营养条件有限的情况下呈S型增长。,探究:培养液中,酵母菌种群数量的变化,3,4,介绍:,血球计数板的构造,1、血球计数板:是显微镜上的外挂物件,可用来测量细胞,细菌等一些微小物体的长度,还有就是测量数量,如单位体积细胞的数量。血球计数板是由一块比普通载玻片厚的特制玻片制成的.玻片中有四条下凹的槽,构成三个平台.中间的平台较宽,其中间又被一短横槽隔为两半,每半边上面,刻有一个方格网.,5,化,放大后的方格网计数室,I,H,G,F,E,D,C,B,A,2516,1625,2、方格网的构成:,方格网上刻有9个大方格,其中只有中间的一个大方格为计数室,计数室通常有两种规格.一种是大方格内分为16中格,每一中格又分为25小格;另一种是大方格内分为25中格,每一中格又分为16小格.但是不管计数室是哪一种构造;它们都有一个共同的特点,即,每一大方格都是由1625=2516=400个小方格组成。,6,3、使用方法:,将血球计数板用擦镜纸擦净,在中央的计数室上加盖专用的盖玻片.将稀释后的酵母菌悬液,用吸管吸取一滴置于盖玻片的边缘,使菌液缓缓渗入,多余的菌液用吸水纸吸取,稍待片刻,使酵母菌全部沉降到血球计数室内.加盖盖玻片.,7,计数室有长宽:,1mm1mm为例,2mm2mm,3mm3mm,等,深度均为0.1mm。,5、单位换算:大方格的长和宽各为1mm,深度为0.1mm,其体积为0.1mm,3,.换算为1mL为0.1/1000即1/10000mL即10,-4,mL。,4、计数室的规格:,8,如果使用16格25格规格的计数室,要按对角线位,取左上,右上,左下,右下4个中格(即100个小格)的酵母菌数.,我们用规格为25格16格的计数板,除了取其4个对角方位外,还需再数中央的一个中格(即80个小方格)的酵母菌数.(五点取样法),出芽的酵母菌,芽体达到母细胞大小一半时,即可作为两个菌体计算。,6、如何计数呢?,9,每1ml菌液中所含的酵母菌个数,计算公式(,如,长和宽各为1mm,):,(1)16格25格的血球计数板计算公式,酵母细胞数/ml=,(100小格内酵母细胞个数/100)400稀释倍数,10,-4,即(100小格内酵母细胞个数/100)4,10,6,稀释倍数,(2)25格x16格的血球计数板计算公式:,酵母细胞数/ml=,(80小格内酵母细胞个数/80)400稀释倍数,10,-4,即(80小格内酵母细胞个数/80)4,10,6,稀释倍数,7、,10,课本中大方格的长和宽各为2mm,深度为0.1mm,其体积为0.4mm3.换算为1mL为0.4/1000即4/10000mL即4,10,-4,mL,则:每1ml菌液中所含的酵母菌个数,计算公式(如,长和宽各为2mm,):,(1)16格25格的血球计数板计算公式,酵母细胞数/ml=,(100小格内酵母细胞个数/100)400稀释倍数,4,10,-4,即,(100小格内酵母细胞个数/100)10,6,稀释倍数,(2)25格x16格,的血球计数板计算公式:,酵母细胞数/ml=,(80小格内酵母细胞个数/80)400稀释倍数,即,(80小格内酵母细胞个数/80)10,6,稀释倍数,4,10,-4,11,使酵母菌混合均匀。,可以设置对照。用无菌水代替培养液培养,取样、计数、对比。,或不需要,因不同时间取样已形成对照。,需要。尽量减少误差。对每个样品计数三次,取其平均值。,12,时间(d),酵母菌细胞数量(,10,6,个/mL),A组,B组,C组,A,1,A,2,A,3,平均,B,1,B,2,B,3,平均,C,1,C,2,C,3,平均,1,2,3,4,5,6,7,13,.,当遇到位于方格线上的酵母菌,一般只计数大方格的上方和右方线上的酵母细胞(或只计数下方和左方线上的酵母细胞).,稀释培养液。稀释的目的是便于酵母菌悬液的计数,以每小方格内含有4-5个酵母细胞为宜,一般稀释10倍即可.,8、血球计数板的清洁,血球计数板使用后,用自来水冲洗,切勿用硬物洗刷,洗后自行晾干或用吹风机吹干,或用95%的乙醇,无水乙醇,丙酮等有机溶剂脱水使其干燥.通过镜检观察每小格内是否残留菌体或其他沉淀物.若不干净,则必须重复清洗直到干净为止,14,酵母菌的种群数量在营养条件有限的情况下是呈S型增长。但之后会下降。,15,2根据各组平均数据画出的增长曲线有没有什么总趋势?如果有,作出说明。如果设计了无菌水的对照,也画出增长曲线。,16,0,酵母菌细胞数(,10,6,个/mL),时间,对照组,实验组,3影响酵母菌的种群数量增长的因素可能是什么?,17,1取少量酵母菌液放入血球计数板直接计数,测得的数目是(),A活细胞数 B死细胞数,C菌落数 D细胞总数,A,2、探究酵母菌的种群数量实验中,某学生的部分操作过程如下:,(1)把,酵母菌培养液放置于冰箱中培养,(2)从静置试管中吸取酵母菌培养液计数,(3)到第七天取样计数,请纠正其错误,:,(1)_,(2)_,(3)_.该同学用,25格x16格,其中,长和宽各为2mm,深度为0.1mm,的血球计数板计数,用五点取样法读取,酵母菌有40个,其中稀释了10倍,则,1ml菌液中所含的酵母菌个数为_,应将静置改为轻轻振荡几次.,应放在适宜温度下培养.,应连续七天取样计数.,练习:,(40/80),10,6,10,=5 10,6,18,欢迎指导,19,
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