紫外分光光度计的使用方法.doc

湘潭职业技术学院药学实训中心

UV2600型紫外分光光度计操作规程
一、开机
1. 打开仪器电源。
2. 打开电脑，点击UV Analyst 进入光谱分析软件。
3. 软件将自动搜索仪器端口，点击“联机”，软件与仪器联机成功。
二、选择测试模式
根据实验需求选择测试模式。仪器提供的测试模式有“波长扫描”“时间扫描”“定点测量”“定量测量”“核酸测量”和“蛋白质测量”
【波长扫描】主要用以检测样品对一定范围波长光的吸收情况，以便对样品进行定性测量。
1. 点击左侧主功能栏中的“波长扫描”即可进入波长扫描界面。
2. 根据实验要求，在“设置”设定检测参数。
3. 在样品室内参比及检测光路同时放入装有空白溶液的比色皿。
4. 点击“基线测量”以扣除空白的背景吸收。
5. 将检测光路中的空白溶液换成待测样品。
6. 点击“扫描”。以完成样品波长扫描检测。
7. 点击“保存”并选择保存路径即可保存谱图。
注意：在“基线测量”中所选择的基线必须与参数设置中基线一致！
【时间扫描】是检测样品在特定波长范围内吸光度（或透过率）随时间的推移而发生变化情况。主要用以检测样品的稳定性或进行化学动力学研究。
1. 点击左侧主功能栏中的“定量测量”即可进入定量测量界面。
2. 根据实验要求，在“设置”设定检测参数。
3 在样品室内参比及检测光路同时放入装有空白溶液的比色皿。
4. 点击“基线测量”以后扣除样品空白的背景吸收。
5. 将检测光路中的空白溶液换成待测样品。
6. 点击“扫描”。以完成样品波长扫描检测。
7. 点击“保存”并选择保存路径即可保存谱图。
【定点测量】是检测样品在特定波长中的吸光度（或透过率）。
1. 点击左侧主功能栏中的“定量测量”即可进入定量测量界面。
2. 根据实验要求，在“设置”设定检测参数。
3. 在样品室内参比及检测光路同时放入装有空白溶液的比色皿。
4. 点击“自动校零”，以扣除该波长中空白溶液的背景吸收。
5. 将检测光路中的空白溶液换成待测样品。
6. 点击“测量”，以完成样品的吸光度（或透过率）的测量。
7. 点击“保存”并选择保存路径即可保存测量结果。
【定量测量】可通过检测标准样品或输入特定的系数建立标准曲线后测量样品的浓度值。
1. 点击左侧主功能栏中的“定量测量”即可进入定量测量界面。
2. 根据实验要求，在“设置”设定检测参数并输入标样的浓度值。
3. 在样品室内参比及检测光路同时放入装有空白溶液的比色皿。
4. 点击“自动校零”，以扣除该波长中空白溶液的背景吸收。
5. 将检测光路中的空白溶液换成标样，点击“标样测量”读取标样的吸光度值。
6. 所有标样测量完毕后，将光路中的标样换成待测样品，点击“样品测量”进行样品测量。
7. 点击“保存”并选择保存路径即可保存测量结果。
【核酸测量】
1. 点击左侧主功能栏中的“核酸测量”即可进入核酸测量界面。
2. 根据实验要求，在“设置”设定检测参数。
3. 在样品室内参比及检测光路同时放入装有空白溶液的比色皿。
4. 点击“空白”，以扣除该波长中空白溶液的背景吸收。
5. 将检测光路中的空白溶液换成待测样品，点击“测量”得到230nm、260nm、280nm和320 的吸光度值同时计算出A260/A280、A260/A230和样品浓度。
6. 点击“保存”并选择保存路径即可保存测量结果。
【蛋白质测量】
1. 点击左侧主功能栏中的“蛋白质测量”即可进入蛋白质测量界面。
2. 根据实验要求，在“设置”设定检测参数。
3. 在样品室内参比及检测光路同时放入装有空白溶液的比色皿。
4. 点击“空白”，以扣除该波长中空白溶液的背景吸收
5. 将检测光路中的空白溶液换成待测样品，点击“测量”，仪器会按照设定好的计算方式和浓度计算方法计算出浓度。
6. 样品测量完毕后，点击“结束”生成结果文件。
7. 点击“保存”并选择保存路径即可保存测量结果。
三、关机
将比色皿中的溶液倒尽，然后用蒸馏水或有机溶剂冲洗比色皿至干净，倒立晾干。关电源将干燥剂放入样品室内，盖上防尘罩，做好使用登记，得到管理老师认可方可离开。
四、注意事项：
1. 在光谱线校正过程中光度计状态窗口的读数变化，如测定过程中的改变切换波长，必须重新进行基线校正。
2. 光谱图像要保存的，一定要保存，否定软件关闭后会丢失。
3. 此色皿光亮面一定要用擦镜纸，小心划伤。
4. 先用两个空白溶液，校正吸光度，用一个供试品取代一个空白溶液，测定吸光度。
5. 一般空白放里面一个，供试样品放外面一个。