用ImagJ来进行WB定量分析.doc

用ImagJ来进行WB定量分析
一、利用ImagJ对WB条带进行灰度分析
1、File——》open 打开WB片子
2、把图片转化成灰度图片
image——》type——》8-bit
3、消除背景影响
process——》subtract background 选择50基本可以
4、设置定量参数
analyze——》set measurements，点击面积，平均密度和灰度值及Integrated Density
5、设置单位
analyze——》set scale ，在“unit of length”的方框里输入“pixels”
6、把图片转换成亮带，Edit——》invert
7、选择Freehand
Selection，尽量把条带圈起来，点击键盘m，出来IntDen灰度值
8、复制数据IntDen进行分析
二、利用ImagJ对WB条带进行密度分析
1、File——》open 打开WB片子
2、如条带不正，需修正
image——》transform——》rotate
调节angle值，直到条带水平为止
3、选中矩形选项，圈中第一个条带，然后 analyze——》gels——》select first
lane（快捷键ctrl+1），然后移动第一个条带上的矩形到第二个条带上，analyze——》gels——》select second
lane（快捷键 ctrl+2），最后analyze——》gels——》plotlanes
4、选中直线工具，将开口的波峰关闭
5、选中魔棒工具，点击波峰可以显示波峰下面积，即条带的密度值
6、以第一个数值为基数，其他数值与第一个数值的比值为相对密度