实验诊断 第八章 临床常用免疫学检查.ppt

,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,临床常用免疫学检查,概述：,免疫学,(Immunology),是研究免疫系统的结构与功能，并通过对其在免疫应答过程中所产生的免疫保护与免疫损伤机制的研究，探讨有效的免疫措施，实现以防病、治病为目的的一门现代医学学科。,临床免疫学检查,常用于感染性疾病、自身免疫性疾病、变态反应性疾病、免疫缺陷病、肿瘤等疾病的诊断与疗效监测。,掌握,肿瘤标志物检测的常用指标及临床意义。,掌握,C,反应蛋白检测的临床意义。,熟悉,血清免疫球蛋白、补体检测临床意义,。,熟悉,自身免疫性疾病常用检测项目的临床意义,。,熟悉,血清,ASO,检测,及肥大反应,的临床意义,。,【,教学目标,】,重点：,肿瘤标志物检测的常用指标及临床意义。,C,反应蛋白检测的临床意义。,难点：,自身抗体检测的临床意义。,【,教学重点与难点,】,Company Logo,Company Logo,临床应用范围,临床应用,免疫系统疾病,自身免疫性疾病,肿瘤,感染性疾病,检测项目,血清免疫球蛋白检测,自身抗体检测,肿瘤标志物检测,感染免疫检测,患者，女，,39,岁。,关节肿痛,8,年，肌痛,6,月；伴口干、眼干，脱发。,查体：,T37.9,，,P102,次,/,分，,R50,次,/,分，,BP110/80 mmHg,；,神志清，精神可；浅表淋巴结未触及肿大；胸骨无压痛；双肺呼吸音粗，未闻及干湿性啰音；心率,102,次,/,分，律齐，未闻及明显杂音；腹软，无压痛；双下肢无水肿。,临床病例,-1,？,辅助检查：,血常规：,Hb78g/L,，,RBC3.1810,12,/L,，,WBC2.610,9,/L,，,L18.82%,，,N72.54%,，,MCV80.2fl,，,MCH24.5pg,，,MCHC306g/L,，,HCT26%,，,余正常。,ESR,大于,100mm/h,。,风湿三项：,ASO,、,RF,正常，,CRP46.8mg/L,。,临床病例,-1,辅助检查：,尿常规：,LEU1+,，,BLD2+,。,免疫球蛋白：,IgA2.77g/L,，,IgG16.35g/L,。,补体：,C3 0.36g/L,，,C4 0.2g/L,。,抗核抗体全谱：,ANA1:1000,；抗,ds,DNA,抗体、抗,SSA,抗体、抗,SSB,抗体、抗组蛋白抗体、抗核小体抗体阳性。,临床病例,-1,Question,diagnose,？,diagnose,？,一、免疫球蛋白,（,Ig,）,的检测,包括：,IgG,、,A,、,M,、,D,、,E,Ig,的产生、结构与功能,Ig,通常是指一组具有,抗体活性,或化学结构与抗体相似,的球蛋白，由浆细胞合成和分泌，有特异性识别抗原的功能，但必须与抗原结合形成免疫复合物后才能启动效应功能。,免疫球蛋白,（,Ig,）,（一）,IgG,含量,：,7.0-16.6g/L,占,70-80,(,含量最多,）,特点,：,再次免疫应答抗体,、具抗菌、抗病毒活性，,能通过胎盘,意义,：感染（病毒、细菌）多克隆,免疫增殖病、,MM,单克隆,减低：免疫缺陷、重链病、轻链病、肾病,（二）,IgA,含量,：,0.7-3.5g/L,，占,10-15,特点,：分泌型（,SIgA),，,局部粘膜抗感染功能,可存在于各种分泌物中,（,初乳,）,血清型（,为单体，免疫作用弱）,意义,：,IgA,型,MM,，,SLE,，类风关等,反复呼吸道感染，非,IgA,免疫增殖病,(,三）,IgM,含量,：,0.5-2.6g/L,占,5-10,特点,：,为,五聚体,，,分子量最大的,Ig,如天然凝集素抗,A,、抗,B,意义,：,早期抗体，出现早,，消失快。,（四）,IgD,、,IgE,IgD:,含量低、作用不很明确,测定较难，,ELISA,法测定,IgE,：含量最少，,ELISA,法测定为,0.1-0.9mg/L,与变态反应、寄生虫病、皮肤过敏有关,二、补体（,Complement,，,C,）,的测定,补体是存在血清及组织液中的一组具有酶原活性的糖蛋白，可溶解细胞，灭活病原体，清除免疫复合物。,总补体活性,CH50,测定,(complement hemolysis 50%,）,溶血素（抗体）致敏绵羊红细胞,补体,溶血,溶血程度与补体正相关，为,S,形曲线。,正常参考值：,50-100kU/L,意义：,减低常见于各种免疫复合物性疾病,溶血程度与补体含量的关系,1.,总补体活性,CH50,测定,2.,补体,C3,与,C4,测定,补体系统有,C1,、,2,、,C9,及其它成分组成,C3,含量最高,，是传统和旁路途径激活的关键,含量,:C3:0.8-1.5g/L,C4:0.2-0.6g/L,补体测定的意义：炎症、肿瘤等,：肾炎、自身免疫病等,三、细胞免疫的测定,T,细胞亚群的检测,1.E,玫瑰花结形成试验（,ERFT),：检测,T,细胞数量,原理：,T,细胞表面具,SRBC,受体,正常,58-72,左右,意义：,见于自身免疫性疾病及器官移植排斥反应等,见于免疫缺陷性疾病等。,2.,淋巴细胞转化试验（,LCT):,检测,T,细胞的生物学功能,原理：淋,T,PHA,淋母细胞,意义：,转化率降低，见于细胞免疫缺陷或细胞免疫功能低下患者。,淋巴细胞亚群的分化抗原测定,(cluster differentiation CD),T,细胞：,CD,3,-,总,T,标志,CD,4,-T,H,标志,(help T cell),CD,8,-Ts,标志,(suppressor T cell),CD,4,/CD,8:,T,H,/Ts,，降低常见于,AIDS,。,B,细胞：,CD,19,、,CD,20,、,CD,22,等,三、细胞免疫的测定,细胞因子,(Cytokine,CK),测定,活化的免疫细胞分泌产生的免疫调节性小分子多肽。,1.,白介素,2,（,IL-2),和,IL-2R,：,白细胞介素,（,IL,）,多种细胞产生的能介导免疫细胞间的相互作用。,IL-2,是由活化,T,细胞产生，具有多向性作用的细胞因子,2.,肿瘤坏死因子（,TNF),：,引起肿瘤组织出血、坏死和杀伤作用。,3.,干扰素（,IFN),：,抗病毒、抗肿瘤作用,三、细胞免疫的测定,四、肿瘤标志物检测,肿瘤标志物,（,tumor marker),是指在肿瘤发生和增殖过程中，由肿瘤细胞本身合成、释放或者是由机体对肿瘤细胞反应而产生的一类物质。包括蛋白质类、糖类和酶类肿瘤标志物。,肿瘤标志物检测的意义是：,高危人群的筛查、辅助诊断、观察疗效和肿瘤复发检测以及判断预后。,临床免疫学检查,肿瘤标志物检测,蛋白质类肿瘤标志物,甲胎蛋白（,AFP,）,癌胚抗原（,CEA,）,前列腺特异性抗原（,PSA,）,糖脂肿瘤标志物,酶类肿瘤标志物,临床病例,-2,患者，男，,43,岁。,右腹间断疼痛半年,。,查体：,T36.2,，,P64,次,/,分，,R16,次,/,分，,BP160/90,mmHg,；精神可，皮肤、巩膜无黄染，睑结膜无苍,白，浅表淋巴结未触及肿大；双肺未闻及干湿啰音；,心率,64,次,/,分，心律齐，各瓣膜听诊区未闻及杂音；,腹平软，右侧腹部可触及大小约,3cm4cm,包块，,有触痛，右侧腹部、左下腹部压痛阳性，无反跳痛，,肝脾肋下未及，肝区无叩痛，移动性浊音阴性，肠,鸣音,4,次,/,分，音正常；双下肢无水肿。,实验室及辅助检查,1.,甲胎蛋白,（,-fetoprotein,，,AFP,）,AFP,是胎儿发育早期合成的一种糖蛋白,(1,球蛋白,),，分子量,70kD,，胎儿出生后不久即逐渐消失。,参考值,：,血清,300g/L,，但有部分患者,AFP,始终不升高；,病毒性肝炎与肝硬化患者，血清中,AFP,可有不同程度的增高，但一般在,3,00g/L,以下；,生殖系统肿瘤和胚胎性肿瘤，如睾丸癌、畸胎瘤等升高；,妊娠三个月后，血清,AFP,含量开始升高，分娩后三周恢复正常。若孕妇血清中,AFP,异常升高，应考虑有胎儿神经管缺损畸形的可能性。,参考值,：,血清,5.0g/L,临床意义,：,结肠癌,、,直肠癌,、胰腺癌、肺癌、乳腺癌、胃癌，转移性,恶性肿瘤也有不同程度的阳性率；在恶性肿瘤的随访，,病情监测，疗效评价等方面有重要价值。,肠道息肉、憩室炎、结肠炎、肝硬化、肝炎、胰腺炎和肺,部疾病也可有不同程度的升高；,吸烟者中有部分人,CEA,5g/L,。,2.,癌胚抗原,（,CEA,）,3.,前列腺特异抗原（,PSA,）,PSA,是一种由前列腺上皮细胞分泌的单链糖蛋白。在血清,中,PSA,以两种生化形式存在：,一部分,(20%),是以低分子量,(33kD),的游离,PSA,（,f-PSA,）,形式存在；,大部分,(80%),是以,PSA,和,1,抗糜蛋白酶、,2-,巨球蛋,白等结合的形式存在，称复合,PSA(c-PSA),。,总,PSA,（,t-PSA,）,包括血清中,f-PSA,和,c-PSA,。,参考值：血清,t-PSA 4.0 g/L,，,f-PSA 0.25,PSA,临床意义,血清,PSA,升高,前列腺癌患者,升高，但大约,25%,患者，其,PSA,水平正常；而大约有,50%,的良性前列腺疾病患者,PSA,水平增高。,前列腺肥大，前列腺炎和泌尿生殖系统的疾病，也可见血清,PSA,水平升高，故当,PSA,在,4.0g/L,10.0g/L,的灰区时，须进行,f-PSA,和,f-PSA/t-PSA,比值的测定。,【,注意事项,】,在采集病人的血标本前进行直肠指诊、前列腺按摩，,导尿等，将会导致血清,PSA,升高，应注意避免。,(,二,),、糖脂类肿瘤标志物检测,（,1,）糖链抗原,19-9(CA19-9),（,3,）糖链抗原,15-3(CA 15-3),（,2,）,糖链抗原,125 (CA 125),（,1,）糖链抗原,19-9(CA19-9),CA19-9,是一种与胰腺癌，胆囊癌，结肠癌和胃癌相关的肿瘤标志物，又称胃肠癌相关抗原。,参考值：血清,CA199 37 kU/L,胰腺癌,首选指标,，血清,CA19-9,水平明显升高，尤其是胰腺,癌晚期病人，血清,CA 19-9,浓度可达,40,万,kU/L,，是重要的辅助诊,断指标；,胆囊癌、胆管壶腹癌、胃癌、结肠癌时，血清,CA19-9,水平明显升高。,胆囊癌、胆管壶腹癌阳性率约为,85%,，胃癌、结肠癌阳性率约为,40%,；,急性胰腺炎，胆囊炎，胆汁淤积性胆管炎，肝硬化，肝炎等,疾病，,CA 19-9,也有不同程度的升高，注意与恶性肿瘤的鉴别。,（,2,）,糖链抗原,125 (CA 125),CA125,是一种糖蛋白性肿瘤相关抗原，存在于卵巢肿瘤的上皮细胞内，对诊断,卵巢癌,有较大临床价值。,参考值：血清,CA 125 35kU/L,卵巢癌,，,阳性率可达,50,90%,。手术和化疗有效者,CA 125,水平很快,下降，若有复发，,CA 125,升高可先于临床症状出现之前。,其他恶性肿瘤，如乳腺癌、胰腺癌、胃癌,47%,、肺癌、结肠直肠癌、,其他妇科肿瘤等也有一定的阳性反应。,非恶性肿瘤，如子宫内膜异位症，盆腔炎，卵巢囊肿，胰腺炎，肝炎，,肝硬化等疾病也有不同程度升高。,妊娠早期，,CA 125,有升高。,（,3,）糖链抗原,15-3(CA 15-3),CA15-3,是一种乳腺癌相关抗原，属糖蛋白，分子量超过,400kD,，对,乳腺癌,有重要的辅助诊断作用。,参考值：血清,CA15-3 25kU/L,乳腺癌,，但在乳腺癌的早期阳性率较低约为,30%,，转移性,乳腺癌阳性率可达,80%,；,其他恶性肿瘤，如肺癌，结肠癌，胰腺癌，卵巢癌，子宫,颈癌，原发性肝癌等，也有不同程度的阳性率；,肝脏，胃肠道，肺，乳腺，卵巢等非恶性肿瘤疾病，阳性,率一般低于,10%,。,(,三,),、肿瘤标志物的选择,选择特异性的肿瘤标志物或最佳组合,动态检测,常用肿瘤标志物联合检测的临床应用,肿瘤 首选标志物 补充标志物,肺癌,NSE,、,CYFRA21-1 CEA,、,TPA,、,SCC,、,ACTH,、降钙素,肝癌,AFP,AFU,、,GT,、,CEA,、,ALP,乳腺癌,CA15-3,、,CA549 CEA,、,hCG,、降钙素、铁蛋白,胃癌,CA72-4 CEA,、,CA19-9,、,CA50,前列腺癌,PSA,f-PSA,、,c-PSA,、,PAP,结肠直肠癌,CEA,CA19-9,、,CA50,胰腺癌,CA19-9,CA50,、,CEA,、,CA125,卵巢癌,CA125,CEA,、,hCG,、,CA72-4,睾丸肿瘤,AFP,、,hCG,宫颈癌,SCC CEA,、,CA125,、,TPA,膀胱癌 无,TPA,、,CEA,骨髓瘤,2-,M,、本周蛋白,原发性肝癌,AFP,小细胞肺癌,NSE,结,/,直肠癌,CEA,胃癌,CA72-4,乳癌,CA15-3,胰腺癌,CA19-9,卵巢癌,CA125,子宫内膜癌,HCG,前列腺癌,PSA,TM,选用,关于,AFP,的叙述，下列哪项是正确的：,A.,是胎儿性蛋白，为胎儿所特有,B.,胎盘亦有产生,C.,至,小儿时期仍有,存在,D.,在,妊娠初期即达到,高峰,E.,成人血中含有微量即为,异常,C,question,下列,哪种情况下,AFP,升高最明显：,A.,急性,重症肝炎,B,.,肝硬变活动期,C.,原发性肝癌,D,.,妊娠,8,个月妇女,E.,生殖腺胚胎肿瘤,C,五、自身抗体检测,-,自身免疫病,是指免疫系统对自身成分的免疫耐受性减低或破坏，产生自身抗体损伤含有相应自身抗原的组织器官而造成的疾病。,是,变性,IgG,刺激机体产生的一种自身抗体，主要存在于类风湿性关节炎患者的血清和关节液中。主要为,IgM,型。,临床意义,：,类风湿性疾病时，,RF,，阳性率达,70-90,;,其他自身免疫性疾病，,RF,亦,（一）类风湿因子,(rheumatoid factor,，,RF),1.ANA(antinuclear antibody):,指抗各种细胞核成分的自身抗体，是血清中存在的一类和自身组织细胞的细胞核发生反应的自身抗体的总称。,无器官和种属特异性,临床意义,：,SLE,(,未治疗的,),，阳性率达,80,一,100,，亦可见于其他自身免疫性疾病。,（二）抗核抗体检测,抗核抗体检测方法：,间接免疫荧光法（,IIF,）,均质型,核膜型,颗粒型,核点型,抗着丝点型,ENA,抗体谱包括,抗,Sm,、抗核糖体、抗,ScL70,、抗,Jo,1,、抗,SSB,、抗,SSA,和抗,nRNP,等的抗体。,临床意义,抗,Sm,抗体,：,SLE,的特异性标志之一,，,抗,dsDNA,和抗,Sm,抗体同时检测，可提高,SLE,的诊断率。,抗,SSA,、,SSB,抗体干燥综合征,抗,nRNP,抗体,-,混合性结缔组织病,2.,可提取性核抗原（,ENA,）抗体谱的检测,抗双链,DNA,（,double stranded-DNA,ds-DNA,）,抗体,抗,dsDNA,抗体靶抗原是细胞核中,DNA,的双螺旋结构。,抗,dsDNA,抗体是,SLE,患者的,特征性标志抗体,。,抗,dsDNA,抗体诊断,SLE,的特异性可达,95%,100%,，但其敏感性仅为,30%,50%,，因此抗,dsDNA,抗体阴性不能排除,SLE,的诊断。,抗,dsDNA,抗体,SLE,特异性抗体，与病情活动度相关。,六、感染的免疫学检查,(,一,),、抗链球菌溶血素,“,O,”,抗体（,ASO,）测定,A,群溶血性链球菌,意义：风湿、风湿性关节炎、风湿性心脏病、,急性肾小球肾炎时,是利用伤寒和副伤寒沙门菌菌液为抗原，检测病人血清中有无相应抗体的一种凝集试验。伤寒,第三周,后阳性率达,80%,，初期阴性,参考值,：,H1:160,，,O1:80,，副伤寒甲、乙、丙,1:80,临床意义,：,O,、,H,均升高：伤寒,O,不高、,H,升高：预防接种或回忆性反应,O,升高、,H,不高：感染早期或交叉反应,（二）、肥达氏反应,C-,反应蛋白测定,C-reactive protein,、,CRP,是一种急性时相反应蛋白,。,能与肺炎双球菌,C,多糖结合。,具有激活补体，促进吞噬和免疫调理作用。,七 其他免疫检测,【Clinical significance】,细菌性感染和病毒性感染的鉴别诊断指标。,组织坏死：心梗、严重创伤等，恶性肿瘤，器官移植后,风湿热活动期：,CRP,明显升高，而治疗好转后，,CRP,逐渐降至正常。,下列,哪种情况,CRP,升高不明显：,A,.,严重组织损伤,B,.,病毒感染,C,.,细菌感染,D,.,风湿活动,E,.,心肌梗死,B,question,Good luck,！,