微生物的实验室培养(课堂PPT).ppt

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,2-1 微生物的实验室培养,培养条件,提供合适的营养和环境条件,确保其他微生物无法进入,（培养基）,（无菌技术）,阅读P14-16，思考：,培养基的概念？种类？基本成分？,无菌技术的概念？,消毒与灭菌的区别？常用方法？,（一）培养基,概念：,种类,（按,物理性质,分）,：,按照微生物对,营养物质,的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质,液体,培养基、,固体,培养基,（不含琼脂）,（含琼脂）,（一）培养基,基本成分：,+满足微生物对,pH、特殊营养物质、氧气,的要求,碳源：,氮源：,水:,无机盐:,（葡萄糖、CO,2,等含C物质）,（铵盐、硝酸铵等含N物质）,碳源,氮源,无机盐,氮源,（二）无菌技术,概念：,种类,指培养微生物操作中，所有,防止杂菌污染,的操作。,作用,特点,杀死,微生物,芽孢,孢子,常用的方法,消毒,灭菌,较为温和,杀死,部分,煮沸消毒法、巴氏消毒法、紫外线、药剂等,杀,不,死,强烈,杀死全部,灼烧灭菌、干热灭菌、高压蒸汽灭菌,杀死,P15 旁栏思考题,P16 旁栏思考题,灼烧灭菌,干热灭菌,高压蒸汽灭菌,160170 12h,100kPa 121 15-30min,适用于：耐高温、保干燥的物品,思考：以下物品，应选用哪种方法来灭菌？,用外焰灼烧,接种环,布器,培养皿,培养基,实验操作大肠杆菌的纯化培养,（一）制备培养基,称量,溶化,灭菌,计算,倒平板,P17 讨论题,实验操作（大肠杆菌的纯化培养）,（二）纯化大肠杆菌,原理：,平板划线法,纯化方法（接种方法）：,在培养基上，将细菌,分散,或,稀释,成单个细胞，使其长成单个菌落,稀释涂布平板法,阅读P18-19，思考：,依据的原理？,操作的过程？,平板划线法,原理：,通过接种环在琼脂固体培养基表面,连续划线,的操作，将聚集的菌种逐步,稀释分散,到培养基的表面。,在数次划线后可以分离到由一个,细胞,繁殖而来的肉眼可见的子,细胞群体,称,菌落,。,操作过程：,灼烧目的？,能否划破培养基？,Why要冷却接种环？,P18 讨论3：,why总是从上一次划线的,末端,开始划线？,线条,末端,的细菌数目比前端少,P18 讨论题1：,每次划线前灼烧接种环，why？划线结束后仍要灼烧接种环，why？,杀死上次划线结束后残留在环上的菌种。,及时杀死环上残留菌种，避免污染环境和感染操作者,复习,培养基的基本成分？,无菌技术的种类？,微生物常用的接种方法？,碳源、氮源、水、无机盐,消毒、灭菌,平板划线法、稀释涂布平板法,稀释涂布平板法,原理：,两大步骤：,将菌液进行一系列的梯度稀释，再将,不同稀释度,的菌液,分别涂布,到琼脂固体培养基的表面进行培养。,在稀释度足够高的菌液里，聚集在一起的微生物将分散成,单个细胞,，从而能在培养基表面形成单个的,菌落,。,涂布器,1、系列稀释操作,10,1,10,2,10,3,10,4,10,5,10,6,2、涂布平板操作,思考：P18 讨论：,涂布平板的所有操作都应在火焰附近进行，目的？,（四）课题延伸（,菌种的保藏,）,临时保藏,：,长期保存,：,（三）结果分析与评价,P20,接种到,固体斜面培养基,，,菌落长成后,4,保存,采用,甘油管藏,法，,-20,保存,