前白蛋白测定试剂盒(免疫比浊法)标准化操作规程.docx

前白蛋白测定试剂盒（免疫比浊法）标准化操作规程
1目的
规范实验室操作，保证检验工作顺利有效进行特制定此规程。
2授权操作人经培训且考核通过的实验室检验人员。
3适用范围 本试剂适用于体外定量检测人血清中前白蛋白的浓度。
4检验方法
本试剂盒采用免疫透射比浊法测定人血清中前白蛋白的浓度。
5检验原理
样本中前白蛋白与抗体结合产生免疫复合物的浊度，根据浊度的高低与样本
中前白蛋白的含量成正比。在340nm处测定吸光度的变化值，即可计算出样本中
前白蛋白的含量。
6标本要求
6.1标本类型：新鲜血清标本，避免溶血。
6.2标本运输：室温条件下运输。
6.3标本保存：若不能及时测定，请尽快置于-20C保存，避免反复冻融。
7试剂及配套品
7.1试剂来源
长春迪瑞医疗科技股份有限公司前白蛋白测定试剂盒
7.2试剂组成
试剂盒组成
试剂组成成份
浓度
试剂1 ( R1)
缓冲液
1mmol/L
试剂2 (R2)
羊抗人前白蛋白抗体
适量
7.3试剂的稳定性与贮存
在2C〜8C条件下，干燥、避光、密封贮存，有效期12个月；启用后在2〜
8 C可稳定30天，试剂不可冰冻。
8实验仪器及性能指标
8.1实验仪器
迪瑞CS系列全自动生化分析仪
8.2试剂性能指标
空白吸光度：A<0.30o
分析灵敏度：测试30 mg/dL被测物时，吸光度变化△ A2 0.015。
8.2.3 线性范围：11mg/dL 〜56mg/dL，线性相关系数 r 值 > 0.99; [11,19] mg/dL区间内，线性绝对偏差应不超过±3.36mg/dL; ( 19, 56] mg/dL区间内，相对偏
差不超过±15%。
准确度：相对偏差应在±20%范围内。
测量精密度：
重复性：CV<7.0%o
批间差：R<8.0%o
8.2.6 空白限 <11.mg/dLo
9校准
9. 1校准品
前白蛋白校准品
9.2校准品存贮及使用注意事项
参见前白蛋白校准品使用说明书。
9.3校准程序
建议使用试剂盒配套的校准品：进行5点校准测定，测定后仪器自动拟合成
校准曲线。当试剂批号更换或质控失控时，需要重新校准。
10质量控制
10.1质控品
前白蛋白质控品
10.2质控品存贮及使用注意事项
参见前白蛋白质控品使用说明书。
10.3质量控制
建议使用迪瑞公司质控品，进行质量控制。实验室应自行建立质控区间和
限值，若质控值失控，应采取纠正措施。
11操作程序
11.1试剂配制
试剂1和试剂2均为液体试剂，可直接使用。
11.2项目参数：
测定模式
两点终点法
试剂1用量
250 ML
主波长
340nm
试剂2用量
50ML
副波长
750nm
样本用量
3ML
测定温度
37 °C
反应时间
3s
比色杯光径
1.0cm
吸光度范围
0A3.2A
反应方向
正反应

11.3样本测试步骤:
样本用量：3pL 记录吸光度A1
试剂R1用量：250 pL 加试剂R2:50 mL 温度：37°C
主波长：340nm
副波长：750nm
记录吸光度A2
3s 3s
11.4计算方法：
根据校准品的浓度和对应吸光度变化值△▲,采用非线性函数(Logit-log5p)
确定校准曲线，所测样本吸光度变化在校准曲线上相对应的浓度值即为所测浓度。
11.5注意事项
本品仅用于体外诊断。
避免测试过程中添加试剂，避免操作时日光直射。
试剂和样本用量可根据不同仪器的要求按比例改变
不同批号试剂盒中各组份不可以互换。
12结果判断
12.1如反应温度为25C或30C，孵育时间相应延长至8分钟或6分钟。
12.2前白蛋白浓度的检测只是临床医师对患者进行诊断的指标之一，临床医师
还要根据患者的体症、病史以及其它的诊断项目、诊断手段进行综合判断。
13参考区间
正常成人的参考值范围：20mg/dL40mg/dL
本参考值范围仅供参考，建议各实验室考虑参考值对接触人群的适用性，如
有必要，应自行确定参考值范围。
14临床意义
前白蛋白的分子量5.4万，由肝细胞合成，在电泳分离时，常显示在白蛋白
的前方，其半衰期很短，仅约12小时。因此，测定其在血浆中的浓度对于了解
蛋白质的营养不良、肝功能不全、比之白蛋白和转铁蛋白具有更高的敏感性，是
临床上判断营养状态的重要指标。
前白蛋白减少常见于急性肝炎、阻塞性黄疸以及肝功能衰竭，此外，营养不
良，造成负氮平衡也会使前白蛋白的含量降低。
15复检操作程序
按仪器使用说明书进行复查操作。
16方法局限性
16.1检验结果的准确性依赖于仪器的校正和测定温度、时间的控制。
16.2当样本中黄疸＞ 1368 ^mol/L、血红蛋白〉10g/L、抗坏血酸＞50mmol/L时
可能会影响检测结果。
17注意事项
样本、废液等有潜在生物传染性，操作者应遵守实验室安全操作规定，并按
当地医疗废弃物、感染性废弃物、产业废弃物等规定处理废液。
18个人防护
18.1若本试剂误入眼内或中、或接触到皮肤时，请迅速用水冲洗，必要
时请接受医生治疗。
18.2请把标本当作可能感染HIV、HBV、HCV等的危险物质处置。为了避免
或减少相关的传染风险，请使用一次性手套。
19当检测系统不能工作时，所采取的补救措施
当仪器发生故障时，迅速联系仪器厂家进行维修。
20参考文献
20.1 Melamies LM, et al. Clin Chem, 1986: 32： 1890 〜1894.
20.2 Winkles JW, et al. Clin Chem, 1989: 35: 303 〜307.
20.3 US Department of Health and Human Services.Biosafety in
Microbiological and Biomedical Laboratories.HHS Publication (CDC),4th ed.
Washington,DC: US Government Printing Office,May 1999.
20.4 NCCLS . Interference Testing in Clinical Chemistry;Approved
Guideline, 25.