APOA1SOP.docx

载脂蛋白A1测定试剂盒（免疫比浊法）标准化操作规程
1目的
规范实验室操作，保证检验工作顺利有效进行特制定此规程。
2授权操作人经培训且考核通过的实验室检验人员。
3适用范围
本试剂适用于体外定量测定人血清中载脂蛋白A1的含量。
4检验方法
本试剂盒采用免疫透射比浊测定法测定载脂蛋白A1的含量。
5检验原理
血样本中载脂蛋白A1与抗载脂蛋白A1血清在液相中反应，比例合适时形
成可溶性免疫复合物。聚乙二醇（PEG60）可沉淀其免疫复合物，使溶液的透光
率（T）下降。免疫复合物的量与载脂蛋白A1和抗载脂蛋白A1量呈函数关系，当
固定抗载脂蛋白A1浓度时，免疫复合物的形成量主要取决于样本中载脂蛋白A1
的含量，并与其呈正相关。通过检测溶液340nm吸光度值，对照标准曲线即可
判定样本中载脂蛋白A1含量。
6检验标本要求
6.1标本类型：样本为血清，应避光保持，不得使用溶血、脂血样本；样本在2〜
8°C可稳定7天、室温稳定1天，-20C保存一个月。不建议采用血浆样本。
6.2标本运输:室温条件下运输。
7试剂及配套品
7.1试剂来源
长春迪瑞医疗科技股份有限公司载脂蛋白A1试剂盒
7.2试剂组成
试剂盒
主要组成成份
浓度/含量
试剂1（R1）
磷酸盐缓冲液
10mmol/L
试剂2（R2）
含有抗人载脂蛋白A1抗体溶液
适量
7.3试剂的稳定性与贮存
在2〜8C条件下，干燥、避光、密封贮存，有效期12个月；开封后2〜8
C可稳定30天，试剂不可冰冻。
8实验仪器及性能指标
8.1实验仪器
迪瑞CS系列全自动生化分析仪
8.2试剂性能指标
空白吸光度：A<0.2O
分析灵敏度：测试1.0g/L被测物时，吸光度变化>0.08o
8.2.3 线性范围：0.40g/L〜2.g/L，线性相关系数:r> 0.99; [0.40, 0.70]g/L
区间内，绝对偏差应不超过±0.12g/L; ( 0.70,2.]g/L区间内，相对偏差不超
过 ±15%。
准确度：80%<回收率<120%。
测量精密度：
重复性：CV<8.0%。
批间差：R<10.0%。
9校准程序
9.1校准品
载脂蛋白A1校准品
9.2校准品存贮及使用注意事项
参见载脂蛋白A1校准品使用说明书。
9.3 校准程序
建议使用试剂盒配套的校准品：进行5点校准测定，测定后仪器自动拟合成
校准曲线。当试剂批号更换或质控失控时，需要重新校准。
10质量控制
10.1质控品
载脂蛋白A1质控品
10.2质控品存贮及使用注意事项
参见载脂蛋白A1质控品使用说明书。
10.3质量控制
建议使用迪瑞公司的质控品，进行质量控制。实验室应自行建立质控区间和
限值。若质控值失控，应采取纠正措施。
11操作程序
11.1试剂配制
试剂1和试剂2均为液体试剂，可直接使用。
11.2项目参数：
测定温度
37 °C
试剂1用量
350 pL
主波长
340nm
试剂2用量
70pL
副波长
7nm
样本用量
2 p L
比色杯光径
1.0cm
反应时间
3s
吸光度范围
0A3.2A
反应方向
正方向
测定模式
两点终点法

11.3样本测试步骤:
样本用量：2pL
试剂R1用量：350 ML
记录吸光度A1
加试剂R2:70ML
温度：37C
主波长：340nm
副波长：7nm

记录吸光度A2

3s
—
3s

1
T
1
F 1
F
11.4计算方法:

根据校准品的浓度和对应吸光度变化值△ A,采用非线性函数(Logit-log5p)
确定校准曲线，所测样本吸光度变化在校准曲线上相对应的浓度值即为所测浓度。
11.5注意事项
本品仅用于体外诊断。
避免测试中途添加试剂。
试剂和样本用量可根据不同仪器的要求按比例改变。
不同批号试剂盒中各组份不可以互换。
12结果判断
12.1如^A/min〉0.010A,可降低样本体积并调整因子数；或稀释后再测试，结
果乘以稀释倍数。
12.2当样本浓度大于2.0g/L时，应将样本稀释至2.0g/L以下，结果乘以稀释
倍数。
12.3载脂蛋白A1的测定只是临床医师对患者进行诊断的指标之一，临床医师还
要根据患者的体症、病史以及其它的诊断项目、诊断手段进行综合判断。
13参考区间
37°C 1.g/L 〜1.60g/L
本参考值范围仅供参考，建议各实验室考虑参考值对接触人群的适用性，如
有必要，应自行确定参考值范围
14临床意义
载脂蛋白A1(Apo A1)是高密度脂蛋白(HDL)的主要结构蛋白，它可以去除细
胞中的胆固醇，因此具有预防动脉粥样硬化的作用。流行病学研究表明以Apo A1
表示的HDL水平与冠心病(CHD)的流行率呈负相关。在使用总胆固醇和甘油三酯
来过筛冠心病危险时，除检测脂蛋白(a)与载脂蛋白B之外，同时检测载脂蛋白
A1能对脂类失调提供更多的信息，也可替代高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)检测。
15复检操作程序
按仪器使用说明书进行复查操作。
16方法局限性
16.1检验结果的准确性依赖于仪器的校正和测定温度、时间的控制。
16.2当样本中黄疸＞ 1368 ^mol/L、甘油三脂〉50mmol/L、血红蛋白〉10g/L、
抗坏血酸＞0.57mmol/L时可能会影响检测结果。
17注意事项
样本、废液等有潜在生物传染性危险，操作者应遵守实验室安全操作规定，
并按当地医疗废弃物、感染性废弃物、产业废弃物等规定处理废液。
18个人防护
18.1若本试剂误入眼内或中、或接触到皮肤时，请迅速用水冲洗，必要
时请接受医生治疗。
18.2请把标本当作可能感染HIV、HBV、HCV等的危险物质处置。为了避免
或减少相关的传染风险，请使用一次性手套。
19当检测系统不能工作时，所采取的补救措施
当仪器发生故障时，迅速联系仪器厂家进行维修。
20参考文献
20.1 Bhatnagar D, Durrington PN. Measurement and clinical significance
of apolipoproteins A-I and B. In: Rifai N, Warnick GR, Dominiczak MH, eds.
Handbook of lipoprotein testing. Washington: AACC Press, 1997: 177198.
20.2李健斋.血清APO免疫测定及其标准化问题.中华医学检验杂志，1992,
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20.3 Bartl R,Hoechtlen-Vollmar W,Thomas L. Monoclonal immunoglobulins.In:
Thomas L. Clinical Laboratory Diagnostics. 1sted. Frankfurt: TH- Books
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20.4 NCCLS.Interference Testing in Clinical Chemistry;Approved
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