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肠杆菌PPT参考课件.ppt

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,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,肠杆菌科细菌,1,概述,埃希菌属,沙门菌属,志贺菌属,耶尔森菌属,枸橼酸杆菌属,克雷伯菌属,肠杆菌属,、,泛菌属、哈夫尼亚菌属,沙雷菌属,变形杆菌属、普罗威登斯菌属及摩根菌属,2,一、,分类,二、,细菌特性,三、,临床意义,四、,鉴定原则,概述,返回,3,返回,4,肠杆菌科的共同特性,1.,形态染色相似,革兰阴性杆菌,2.,培养特性相同 普通培养基上生长良好,3.,生化反应活泼,发酵葡萄糖,氧化酶,阴性,,触酶,阳性,,,还原硝酸盐为亚硝酸盐,,O/F,试验为发酵型。,4.,抗原构造复杂,5.,抵抗力弱,6.,易变异,返回,5,O-F,试验,氧化型,发酵型,产碱型,6,氧化酶试验,阳性,:,紫红色,阴性:无色,7,硝酸盐还原试验,阳性:红色 阴性:淡黄色,8,肠杆菌科细菌抗原模式图,返回,9,致病物质,所致疾病,临床意义,返回,10,菌毛或菌毛样结构,荚膜或微荚膜,内毒素,外毒素,致病物质,11,所致疾病,肠道感染,腹泻、食物中毒、肠热症,肠道外感染,鼠疫(烈性传染病)、泌尿道感染、,肺炎、脑膜炎、伤口化脓、菌血症,返回,12,鉴定原则,1.,科间鉴别,2.,将肠杆菌科分为三大类,3.,属、种、群、型的区分,4.,肠杆菌科细菌综合鉴定流程,返回,13,肠杆菌科与其它革兰阴性杆菌区别,14,苯丙氨酸脱氨酶试验阳性:绿色 阴性:黄色,15,葡萄糖酸盐试验阳性:黄绿色 阴性:蓝色,返回,16,埃希菌属,一、分类,二、细菌特性,三、临床意义,四、微生物学检验,返回,17,细菌特性,形态特征,培养特性,生化反应,抗原结构,18,大肠埃希菌革兰染色,19,大肠埃希菌电镜图,20,大肠埃希菌菌落特征(血平板),21,大肠埃希菌菌落特征(,MAC,),22,大肠埃希菌,KIA,(,AA,),MIU,(),23,大肠埃希菌,IMViC,试验(),右侧为对照(,),24,大肠埃希菌抗原结构,25,致病物质,所致疾病,临床意义,26,致病物质,侵袭力 菌毛、,K,抗原,内毒素,肠毒素 耐热肠毒素(,ST,),不耐热肠毒素(,LT,),27,所致疾病,肠道外感染,泌尿道感染(最常见),胆道感染、腹膜炎、肺炎,菌血症、新生儿脑膜炎,肠道感染,ETEC,、,EPEC,、,EIEC,、,EHEC,、,EaggEC,28,(一)检验程序(二)标本采集,(三)检验方法(四)耐药性(五)结果分析与报告,微生物学检验,29,大肠埃希菌检验程序,30,检验方法,1.,显微镜检查,2.,分离培养,3.,鉴定,ETEC,EPEC,EIEC,EHEC,EaggEC,31,ST,检测(乳鼠灌胃试验),32,LT,检测(,CHO,细胞培养),33,O157:H7,菌落特征(,MAC,),34,O157:H7,菌落特征(山梨醇麦康凯琼脂平板),返回,35,沙门菌属,一、分类,二、细菌特性,三、临床意义,四、微生物学检验,返回,36,37,细菌特性,形态特征,培养特性,生化反应,抗原结构,38,伤寒沙门菌革兰染色,39,伤寒沙门菌菌落特征(,MAC,),40,伤寒沙门菌菌落特征(,SS,),41,伤寒沙门菌菌落特征(,血平板,),42,伤寒沙门菌,KIA,(,K A,),MIU,(),43,沙门菌,IMViC,试验(),44,抗原构造和分类,1,O,抗原,O,抗原有许多组成成分,,每组细菌带有数种,O,抗原;不同种的细菌可有共同的,O,抗原,。将具有共同抗原的沙门菌归为一,组,(group),,现有,42,个,O,组。,引起人类沙门菌病的细菌多属,A,F,组,2,H,抗原,沙门菌属的,H,抗原有两种,称第,1,相(特异相)和第,2,相(非特异相)。具有两种相抗原的细菌叫双相菌;仅有其中一相者称单相菌。,按,O,抗原分组后,每一组沙门菌再根据,H,抗原分成不同的种或血清型。,3,Vi,抗原,Vi,抗原有抗吞噬作用,并保护菌体不受抗体和补体的作用。,Vi,抗原的抗原性弱,刺激机体产生的抗体效价低。细菌在体内不断地刺激机体才有抗体产生;如果细菌消失则抗体也随之消失。,生物学性状,45,变异性,S-R,H-O,位相变异,V-W,46,抵抗力,不强,对胆盐、煌绿有抵抗力,47,致病物质,所致疾病,临床意义,48,致病物质,侵袭力,Vi-Ag,内毒素,肠毒素,49,所致疾病,伤寒和副伤寒,急性胃肠炎或食物中毒,菌血症(或败血症),50,(一)检验程序(二)标本采集,(三)检验方法(四)耐药性(五)结果分析与报告,微生物学检验,51,沙门菌检验程序,、,52,标本,菌血症时取血,胃肠炎取粪便、呕吐物或可疑食物。肠热症在病程不同阶段采取不同标奉:第,1w,取血或骨髓。第,1w,血培养阳性率达,80,以上;骨髓培养阳性率可达,90,95%,以上:第,2,、,3w,以后取粪便、尿。粪便标本应做多次培养,;,全程均可取骨髓培养。,微生物学检查法,53,54,检验方法,1.,显微镜检查,2.,分离培养,3.,鉴定,4.,血清学诊断,55,56,沙门菌血清学鉴定,57,微生物学检查法,血清学诊断,常规方法是,肥达反应(,Widal reaction,),,即用已知的伤寒沙门菌,O,、,H,和甲、乙型副伤寒沙门菌,H,抗原与病人血清做定量凝集试验。,一般说,间隔,5-7d,重复采血,如凝集价随病程延长而升高,4,倍以上,方有诊断价值。,1,正常凝集价,一般情况下,伤寒沙门菌,O,抗体的凝集价应在,1,:,80,以上,,H,抗体凝集价在,1,:,160,以上,甲、乙型副伤寒沙门菌,H,抗体凝集价在,1,:,80,以上有诊断意义。,2,病程,。,3,H,抗体与,O,抗体的性质及其消长的意义,1,)若,0,与,H,凝集价均超过正常值,则伤寒的可能性很大;,2,)若二者均低于正常值,则可能性甚小;,3,)若,O,凝集价高而,H,低于正常值,则可能是感染早期或沙门菌属中其他的细菌感染引起的,O,凝集的交叉反应;,4,)若,O,凝集价低而,H,高于正常值,则可能是以往预防接种的结果或非特异性回忆反应。,58,肥达反应,(Widal test),O,凝集,(,1:20,1:1280,,效价,1:80,),H,凝集,(,1:20,1:1280,,效价,1:320,),返回,59,志贺菌属,一、分类,二、细菌特性,三、临床意义,四、微生物学检验,返回,60,志贺菌属分为,A,、,B,、,C,、,D 4,群:,A,群为痢疾志贺菌(,S.dysenteriae,),,B,群为福氏志贺菌(,S.flexneri,),,C,群为鲍氏志贺菌(,S.boydii,),,D,群为宋内志贺菌(,S.sonnei,)。,61,细菌特性,形态特征,培养特性,生化反应,抗原结构,62,形态、染色、培养及生化反应,G,-,杆菌、无鞭毛、无动力,有些菌体周围有菌毛。,在,S-S,培养基上形成无色半透明光滑型菌落。,分解葡萄糖产酸不产气,大多数志贺菌不发酵乳糖。,抗原构造与分类,志贺菌属缺少,H,抗原,其抗原结构主要由,O,抗原和,K,抗原组成。,根据生化反应和,O,抗原结构的差异,将志贺菌属分为,A,、,B,、,C,、,D 4,个群。,抵抗力,本属细菌对理化因素抵抗力较弱,对酸性环境也较敏感。,对多种抗生素易形成耐药性(主要由,R,质粒决定),并在菌间传递。,生物学性状,63,志贺菌革兰染色,64,志贺菌菌落特征,(MAC),65,志贺菌,KIA,(,K A,),MIU,(),66,志贺菌,IMViC,试验(),67,致病物质,所致疾病,临床意义,68,致病物质,侵袭力 菌毛,内毒素,外毒素 志贺毒素,(ST),69,所致疾病,急性细菌性痢疾,慢性菌痢,带菌者,70,(一)检验程序(二)标本采集,(三)检验方法,(四)耐药性(五)结果分析与报告,微生物学检验,71,志贺菌检验程序,72,在抗生素使用前采集新鲜粪便中脓、血、黏液部分,床边接种或立即送检,不能及时接种者可用卡,-,布运送培养基送检,昏迷不能排便病人可用肛拭取样。,返回,73,耶尔森菌属,一、分类,二、,鼠疫耶尔森菌,三、,小肠结肠炎耶尔森菌,四、其他耶尔森菌,返回,74,其他尚有:,假结核耶尔森菌(,Y.pseudotuberculosis,),奥氏耶尔森菌(,Y.aldouae,),伯氏耶尔森菌(,Y.bercovieri,),弗氏耶尔森菌(,Y.frederiksenii,),中间耶尔森菌(,Y.intermedia,)等,9,种耶尔森菌。,均可从临床标本中分离得到,其相互之间的生化性状相似,均能在,4,以及在,CIN,上生长,可在冷冻食品中增殖,并具有潜在的致病性。,75,鼠疫耶尔森菌,(一)细菌特性,(二)临床意义,(三)微生物学检验,76,细菌特性,形态特征,培养特性,生化反应,77,鼠疫耶尔森菌镜下形态(,Wayson,染色),78,鼠疫耶尔森菌菌落特征(,MAC,),79,致病物质,所致疾病,临床意义,80,致病物质,侵袭力,FI,抗原(封套抗原),V/W,抗原(毒力抗原),内毒素,鼠毒素,81,所致疾病,甲类烈性传染病,鼠疫,常见临床类型:,腺鼠疫,败血型鼠疫,肺鼠疫,82,83,(一)检验程序,(二)标本采集,(三)检验方法(四)结果分析与报告,微生物学检验,84,一旦疑为本菌,应立即向本地区疾病控制中心等部门报告,并将菌种送检验中心或专业实验室作进一步鉴定。诊断确立后除对患者进行隔离治疗外,对疫区及有关人员须采取有效的预防隔离措施,防止疫情扩散。,85,鼠疫耶尔森菌检验程序,86,标本采集,1.,临床标本 淋巴结穿刺液、血液或痰标本,2.,非临床标本 尸检取病变组织,鼠标本应严格消毒体表,再进行采集,返回,87,小肠结肠炎耶尔森菌,(一)细菌特性,(二)临床意义,(三)微生物学检验,88,细菌特性,形态特征,培养特性,生化反应,89,小肠结肠炎耶尔森菌革兰染色,90,小肠结肠炎耶尔森菌菌落特征(,MAC,),91,小肠结肠炎耶尔森菌菌落特征(,CIN,琼脂平板,),92,致病物质,侵袭力,肠毒素,所致疾病,小肠炎、,结肠炎、胆囊炎,腹膜炎、菌血症,临床意义,93,小肠结肠炎耶尔森菌检验程序,94,KIA,:,AA,-,或,KA,-,枸橼酸盐(,-,),脲酶(,+,),吲哚(,-,/+,),鸟氨酸脱羧酶(,+,),动力、,V-P,反应结果与孵育温度有关(,22,25,阳性,,35,37,阴性),根据菌落特征,菌体形态染色特点、嗜冷性及典型生化结果即可初步诊断本菌。,返回,95,枸橼酸杆菌属,一、分类,二、细菌特性,三、临床意义,四、微生物学检验,返回,96,弗劳地枸橼酸杆菌(,C.freundii,),异型枸橼酸杆菌(,C.diversus,),无丙二酸盐枸橼酸杆菌(,C.amalonaticus,),97,细菌特性,形态特征,培养特性,生化反应,98,弗劳地枸橼酸杆菌菌落特征(,MAC,),99,枸橼酸杆菌,IMViC(,),返回,100,克雷伯菌属,一、分类,二、细菌特性,三、临床意义,四、微生物学检验,返回,101,肺炎克雷伯菌(,K.pneumoniae,),产酸(催娩)克雷伯菌(,K.axytoca,),解鸟氨酸克雷伯菌(,K.ornithinolytica,),植生克雷伯菌(,K.planticola,),土生克雷伯菌(,K.terrigena,),肺炎克雷伯菌又可分为,3,个亚种:,肺炎克雷伯菌肺炎亚种(,subsp.pneumoniae,)肺炎克雷伯菌臭鼻亚种(,subsp.ozaenae,),肺炎克雷伯菌鼻硬结亚种(,subsp.rhinoscleromatis,),返回,102,细菌特性,形态特征,培养特性,生化反应,103,肺炎克雷伯菌革兰染色,104,肺炎克雷伯菌电镜图,105,肺炎克雷伯菌荚膜染色,106,肺炎克雷伯菌的菌落特征(血琼脂平板),107,肺炎克雷伯菌的菌落特征(,MAC,),108,肺炎克雷伯菌粘丝试验,109,肺炎克雷伯菌,KIA,(,A A,)、,MIU,(),110,肺炎克雷伯菌,IMViC,试验(),111,克雷伯菌属的细菌多感染免疫力低下的人群,是医院感染中最重要的条件致病菌。,所致疾病:肺炎、脑膜炎、腹膜炎、泌尿系统感染、败血症,临床意义,112,(一)检验程序(二)标本采集,(三)检验方法(四)耐药性(五)结果分析与报告,微生物学检验,113,肺炎克雷伯菌易产生超广谱,-,内酰胺酶(,ESBL,),近年来文献报道我国产酶率已达,30%,左右,产酶株对青霉素类、第,1,、,2,、,3,代头孢菌素及单环,-,内酰胺类抗生素均产生耐药,而仅对头霉素类、碳青霉烯类及酶抑制剂敏感。,ESBL,检测现已作为医院细菌室常规检测项目。,114,肺炎克雷伯菌检验程序,115,检验方法,1.,显微镜检查,2.,分离培养,3.,鉴定,116,肺炎克雷伯菌荚膜肿胀试验,返回,117,肠杆菌属,一、分类,二、细菌特性,三、临床意义,四、微生物学检验,返回,118,产气肠杆菌(,E.aerogenes,),阴沟肠杆菌(,E.cloacea,),日勾维肠杆菌(,E.gergoviae,),阪崎肠杆菌(,E.sakazakii,),中间型肠杆菌(,E.intermedium,),泰洛肠杆菌(,E.taylorac,),河生肠杆菌(,E.amnigenus,),阿氏肠杆菌(,E.asburiac,),致癌肠杆菌(,E.cancerogenus,),溶解肠杆菌(,E.dissolvens,),超压肠杆菌(,E.nimipressualis,),119,细菌特性,形态特征,培养特性,生化反应,120,阴沟肠杆菌革兰染色,121,阴沟肠杆菌菌落特征,(MAC),122,产气肠杆菌,IMViC,试验(),123,肠杆菌属是肠杆菌科中最常见的环境菌群,医院感染的重要病原菌。在临床微生物室检出率最高的是阴沟肠杆菌和产气肠杆菌,可引起泌尿道感染、呼吸道感染、伤口感染以及败血症。,临床意义,124,(一)检验程序(二)标本采集(三)检验方法(四)耐药性(五)结果分析与报告,125,IMViC,试验,大肠埃希菌为,+,-,肠杆菌属细菌大多为,-,+,动力和鸟氨酸脱羧酶试验,肺炎克雷伯菌为阴性,肠杆菌属多数为阳性,126,肠杆菌科细菌常产生,AmpC,酶,尤以阴沟肠杆菌最为突出。它是导致革兰阴性菌尤其是阴沟肠杆菌对,1,3,代头孢菌素、单环,-,内酰胺类、头霉素类及含酶抑制剂的复合制剂耐药的重要原因。,产,AmpC,酶细菌的治疗,首选,4,代头孢(头孢吡肟)和碳青霉烯类抗生素。近年来已有质粒介导的,AmpC,酶出现。,返回,127,泛菌属与哈夫尼亚菌属,一、泛菌属,(一)分类,(二)细菌特性,(三)临床意义,(四)微生物学检验,二、哈夫尼亚菌属,(一)分类,(二)细菌特性,(三)临床意义,(四)微生物学检验,返回,128,聚团泛菌(,P.agglomerans,),弥散泛菌(,P.dispersa,),聚团泛菌,包括以前的典型聚团肠杆菌、草生欧文氏菌和鸡血藤欧文氏菌。,129,聚团泛菌菌落特征(普通琼脂),130,蜂房哈夫尼亚菌菌落特征(,MAC,),返回,131,沙雷菌属,一、分类,二、细菌特性,三、临床意义,四、微生物学检验,返回,132,粘质沙雷菌(,S.marcescens,),沙雷菌液化群(,S.lique faciens group,),臭味沙雷菌(,S.odorifera,),普城沙雷菌(,S.plymuthica,),深红沙雷菌(,S.rubidaea,),无花果沙雷菌(,S.ficaria,),嗜虫沙雷菌(,S.entomophila,),居泉沙雷菌(,S.fonticola,),133,粘质沙雷菌菌落特征(普通琼脂平板),134,粘质沙雷菌、液化沙雷菌和深红沙雷菌都是已证实的条件致病菌,其中粘质沙雷菌是医院感染的重要条件致病菌之一,是引起肠道外感染的主要病原菌,可导致肺部感染、脑膜炎、心内膜炎、泌尿道感染、败血症、输血和外科手术后感染等。,返回,135,变形杆菌属、普罗威登斯菌属、摩根菌属,一、,变形杆菌属,二、,普罗威登斯菌属,三、,摩根菌属,返回,136,一、变形杆菌属,(一)分类,(二)细菌特性,(三)临床意义,(四)微生物学检验,返回,137,细菌特性,形态特征,培养特性,生化反应,138,变形杆菌革兰染色,139,变形杆菌鞭毛染色,140,变形杆菌迁徙生长现象(普通琼脂平板),141,变形杆菌菌落特征(,MAC,),142,变形杆菌,KIA,(,K A+,),MIU,(,+/-+,),143,变形杆菌苯丙氨酸脱氨酶试验(),144,生物学性状,变形杆菌的,O,、,H,两种抗原可用以分血清群及型别。,外斐反应,(Weil-Felix reaction),:,本属细菌中的某些特殊菌株如,X19,、,X2,及,XK,的,O,抗原能与立克次体患者血清凝集。因此可用这些变形杆菌菌株代替立克次体抗原与患者血清做凝集反应。,145,根据典型的迁徙现象,迅速分解尿素,苯丙氨酸脱氨酶阳性,,KIA,为,KA+,,,IMViC,为,-,/+,-,,可鉴定为变形杆菌。,146,返回,147,二、普罗威登斯菌属,(一)分类,(二)细菌特性,(三)临床意义,(四)微生物学检验,返回,148,雷氏普罗威登斯菌菌落特征(,MAC,),149,三、摩根菌属,(一)分类,(二)细菌特性,(三)临床意义,(四)微生物学检验,返回,150,摩根摩根菌菌落特征(,MAC,),151,
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