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各种平板配方.docx

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培养基配方 1玫瑰红钠琼脂培养基 胨5.0g玫瑰红钠0.0133g葡萄糖10.0g琼脂14.0g磷酸二氢钾1.0g水10ml硫酸镁0.5g除葡萄糖、玫瑰红钠外,取上述成分,混合,微温溶解,滤过,参加葡萄糖、玫瑰红钠,分装,灭菌。 2酵母浸出粉胨葡萄糖琼脂培养基〔YPD〕 胨10.0g琼脂14.0g酵母浸出粉5.0g水10ml葡萄糖20.0g除葡萄糖外,取上述成分,混合,微温溶解,滤过,参加葡萄糖,分装,灭菌。 3胆盐乳糖培养基〔BL〕 胨20.0g磷酸二氢钾1.3g乳糖5.0g牛胆盐2.0g氯化钠5.0g [或去氧胆酸钠〕〔0.5g〕磷酸氢二钾 4.0g水 10ml 除乳糖、牛胆盐〔或去氧胆酸钠〕外,取上述成分,混合,微温溶解,调节pH值使灭菌后为7.4±0.2煮沸,滤清,参加乳糖、牛胆盐〔或去氧胆酸钠〕,分装,灭菌。 4乳糖胆盐发酵培养基 蛋白胨20.0g 0.04%臭甲酚紫水溶液25ml乳糖10.0g水10ml牛胆盐5.0g除0.04%臭甲酚紫水溶液外,取上述成分,混合,微温溶解,调节pH值使灭菌后为7.4±0.2,参加0.04%臭甲酚紫指示液,根据要求的用量分装于含倒管/27.19的试管中。灭菌。所用倒管的规格应保证产气结果的观察。 5. 曙红亚甲蓝琼脂培养基〔EMB〕 营养琼脂培养基1ml曙红钠指示液2ml20 %乳糖溶液5ml亚甲蓝指示液1.3〜1.6ml取营养琼脂培养基,加热溶化后,冷至60C,按无菌操作参加灭菌的其他3种溶液,摇匀,倾注平皿。 6. 麦康凯琼脂培养基〔MacC〕 胨20.0g 1中性红指示液3ml乳糖10.0g琼脂14.0g牛胆盐5.0g水10ml氯化钠5.0g除乳糖、1%中性指示液、牛胆盐及琼脂外,取上述成分,混合,微温溶解,调节pH值使灭菌后为7.2±0.2参加琼脂,加热溶化后,再参加其余各成分,摇匀,分装,灭菌,冷至约60°C,倾注平皿。 7.4-甲基伞形酮葡糖苷酸〔4-methylumbelliferyf-D-glucuronide, MUG〕培养基 胨10.0g磷酸二氢钾〔无水〕0.9g硫酸锰0.5mg磷酸氢二钠〔无水〕6.2g硫酸锌0.5mg亚硫酸钠40mg硫酸镁0.1g去氧胆酸钠1.0g氯化钠5.0g MUG 75mg氯化钙50mg水10ml除MUG外,取上述成分,混合,微温溶解,调节pH值使灭菌后为7.3±0.1,参加MUG,溶解,每管分装5ml,灭菌。 8三糖铁琼脂培养基〔TSI〕 胨20.0g硫酸亚铁0.2g牛肉浸出粉5.0g硫代硫酸钠0.2g乳糖10.0g 0.2酚磺酞指示液12.5ml蔗糖10.0g琼脂12.0g/27.20葡萄糖1.0g水10ml氯化钠5.0g除三种糖、0.2舫磺酞指示液、琼脂外,取上述成分,混合,微温溶解,调节pH值使灭菌后为7.3±0.1,参加琼脂,加热溶化后,再参加其余各成分,摇匀,分装,灭菌,制成高底层〔2〜3cm〕短斜面。 9. 四硫磺酸钠亮绿培养基〔TTB〕 胨5.0g硫代硫酸钠30.0g牛胆盐1.0g水10ml碳酸钙10.0g取上述成分,混合,微温溶解,灭菌。临用前,取上述培养基,每10ml参加碘试液0.2ml和亮绿试液0.1ml,混匀。 10. 沙门、志贺菌属琼脂培养基〔SS〕 胨5.0g硫代硫酸钠8.5g牛肉浸出粉5.0g中性红指示液2.5ml乳糖10.0g亮绿试 液0.33ml牛胆盐8.5g琼脂16.0g 枸橼酸钠8.5g水10ml枸橼酸铁铵1.0g除乳糖、中性红指示液、琼脂外,取上述成分,混合,微温溶解,调节pH值使灭菌后为7.2±0.1,滤过,参加琼脂,加热溶化后,再参加其余各成分,摇匀,灭菌,冷至60C,倾注平皿。 12. 胆盐硫乳琼脂培养基〔DHL〕 胨20.0g枸橼酸钠1.0g牛肉浸出粉3.0g枸橼酸铁铵1.0g乳糖10.0g中性红指示液3ml蔗糖10.0g琼脂16.0g去氧胆酸钠1.0g水10ml硫代硫酸钠2.3g/27.2除糖、指示液及琼脂外,取上述成分,混合,微温溶解,调节pH值使灭菌后为7.2±0.1,参加琼脂,加热溶化后,再参加其余成分,摇匀,冷至60C,倾注平皿。 13. 溴化十六烷基三甲铵琼脂培养基 胨10.0g溴化十六烷基三甲铵0.3g牛肉浸出粉3.0g琼脂14.0g氯化钠5.0g水10ml除琼脂外,取上述成分,混合,微温溶解,调节pH值使灭菌后为7.5±0.1,参加琼脂,加热溶化后,分装,灭菌,冷至60C,倾注平皿。 14. 亚碲酸盐肉汤培养基 临用前,取灭菌的营养肉汤培养基,每1ml中参加新配制的1%亚碲酸钠〔钾〕试液0.2ml,混匀,即得。 15 .卵黄氯化钠琼脂培养基 胨6.0g 10%氯化钠卵黄液1ml牛肉浸出粉1.8g琼脂14.0g氯化钠30.0g水650ml除10%氯化钠卵黄液外,取上述成分,混合,微温溶解,调节pH值使灭菌后为7.6±0.1,灭菌,待冷至约60C,以无菌操作参加10%氯化钠卵黄液,充分振摇,倾注平皿。10%氯化钠卵黄液的制备取新鲜鸡蛋1个,以无菌操作取出卵黄,放入10%无菌氯化钠溶液1ml中,充分振摇,即得。 16. 甘露醇氯化钠琼脂培养基 胨10.0g酚磺酞指示液2.5ml牛肉浸出粉1.0g琼脂14.0g甘露醇10.0g水10ml氯化钠75.0g除甘露醇、酚磺酞指示液及琼脂外,取上述成分,混合,微温溶解,调节pH值使灭菌后为7.4±0.2参加琼脂,加热溶化后,滤过,分装,灭菌,冷至60C,倾注平皿。/27.22 17. 乳糖发酵培养基 胨20.0g 0.04溴甲酚紫指示液25ml乳糖10.0g水10ml除0.04%臭甲酚紫指示液外,取上述成分,混合,微温溶解,调节pH值使灭菌后为7.2±0.2,参加指示液,分装于含倒管的小试管中,每管3ml。灭菌。 18. 绿脓菌素〔Pyocyanin〕测定用培养基〔PDP琼脂培养基〕 胨20.0g甘油10ml氯化镁〔无水〕1.4g琼脂14.0g硫酸钾〔无水〕10.0g水10ml取胨、氯化镁、硫酸钾和水混合,微温溶解,调节pH值使灭菌后为7.3±0.1,参加甘油及琼脂,加热溶化,混匀,分装于试管,灭菌,置成斜面。 19. 梭菌增菌培养基 牛肉浸出粉10.0g盐酸半胱氨酸0.5g胨10.0g氯化钠5.0g酵母浸出粉3.0g醋酸钠3.0g可溶淀粉1.0g琼脂0.5葡萄糖5.0g水10mL取上述成分,混合,加热煮沸使溶解,调节pH值使灭菌后为6.8±0.2热溶化,滤过,分装,灭菌。 20. 哥伦比亚琼脂培养基 酪蛋白胰酶消化物10.0g肉胃酶消化物5.0g心胰酶消化物3.0g氯化钠5.0g玉米淀粉1.0g琼脂15.0g酵母浸出粉5.0g水10ml除琼脂外,取上述成分,混合,微温溶解,调节pH值使灭菌后为7.3±0.2参加琼脂,加热溶化,滤过,分装,灭菌,冷至45〜50C,参加相当于20mg庆大霉素的无菌硫酸庆大霉素,混匀,倾注平皿。 21. 沙氏葡萄糖液体培养基 葡萄糖40g水10ml/27.23蛋白胨10g除葡萄糖外。取上述成分,混合,微温 溶解,滤过。参加葡萄糖,溶解,分装,灭菌。 22 .沙氏葡萄糖琼脂培养基 葡萄糖40g琼脂15〜18g蛋白胨10g水10ml除琼脂和葡萄糖外。混合,微温溶解,滤过。参加琼脂和葡萄糖,溶解,分装,灭菌。 23.念珠菌显色培养基(CHROMagar) 蛋白胨10.2g琼脂15g氢罂素0.5g灭菌水10ml色素22.0g除琼脂外,取上述成分,混合,微温溶解,调节pH值至6.3±0.2。滤过,参加琼脂,加热煮沸,不断搅拌至琼脂完全溶解,倾注平皿。 24.1%吐温80-玉米琼脂培养基 黄色玉米粉40g琼脂10〜15g聚山梨酯80 10ml水10ml取玉米粉、吐温80及蒸馏水5ml,混合,65C加热30分钟,混匀,用纱布滤过,补足原水量。取琼脂,水5ml,混合,加热溶解。将以上两种溶液混合,摇匀,分装,灭菌。 二盐酸二甲基对苯二胺试液取二盐酸二甲基对苯二胺0.1g,加水10ml,即得。需新鲜少量配制,于冷处避光保存,如试液变成红褐色,不可使用。 亚碲酸钠〔钾〕试液取亚碲酸钠〔钾〕0.1g,加新鲜煮沸后冷至50°C的水10ml使溶解。 玫瑰红钠试液取玫瑰红钠0.1g,加水使溶解成75ml。亮绿试液取亮绿0.1g,加水1ml使溶解。 盐酸试液取盐酸8.4ml,加水使稀释成1ml。 靛基质试液取对二甲氨基苯甲醛5.0g,参加戊醇〔或丁醇〕75ml,充分振摇,使完全溶解后,再取浓盐酸25ml**滴入,边加边振摇,以免骤热导致溶液色泽变深,或取对二甲氨基苯甲醛1.0g,参加95%乙醇95ml,充分振摇,使完全溶解后,取盐酸20ml**滴入。 碘试液取碘6g与碘化钾5g,加水20ml使溶解。 过氧化氢试液取浓过氧化氢溶液〔30%〕,加水稀释成3%的溶液。临用时配制。 指示液 中性红指示液取中性红1.0g,研细,加95 %乙醇60ml使溶解,再加水至1ml。变色范围pH6.8〜8.0〔红-黄〕。/27.26 亚甲蓝指示液取亚甲蓝0.5g,加水使溶解成1ml。 酚磺酞指示液取酚磺酞1.0g,加1mol/L氢氧化钠溶液2.82ml,使溶解,再加水至1ml。变色范围pH6.8〜8.4〔黄-红〕。 溴甲酚紫指示液取溴甲酚紫1.6g,加95%乙醇使溶解成1ml。变色范围pH5.2〜6.8〔黄-紫〕。 曙红钠指示液取曙红钠2.0g,加水使溶解成1ml。
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